紫外分光光度計,就是根據(jù)物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。紫外分光光度計在檢測的*步的時候,首先要做到為儀器選擇合適的波長范圍,否則會很容易對被測物體的結果造成誤差,紫外分光光度計可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。紫外分光光度計廣泛應用于冶金、機械、化工、醫(yī)療衛(wèi)生、臨床檢驗、生物化學、環(huán)境保護、食品、材料科學等領域的生產(chǎn)、教學和科研工作中,特別適合對各種物質進行定量及定性分析。
紫外分光光度計工作原理
物質的吸收光譜本質上就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同。因此,每種物質就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據(jù)物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。
又因為許多物質在紫外-可見光區(qū)有特征吸收峰,所以可用紫外分光光度法對這些物質分別進行測定(定量分析和定性分析)。紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律。
首先確定實驗條件,并在此條件下測得標準物質的吸收峰以及其對應波長值(同時可獲得該物質的zui大吸收波長);再在選定的波長范圍內(或zui大波長值處),分別以(不同濃度)標準溶液的吸光度和溶液濃度為橫、縱坐標繪出化合物溶液的標準曲線得到其所對應的數(shù)學方程;接著在相同實驗條件下配制待測溶液,測得待測溶液的吸光度,zui后用已獲得的標準曲線方程求出待測溶液中所需測定的化合物的含量。
凡具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結構的有機化合物,根據(jù)在特定吸收波長處所測得的吸收度,可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測定。