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貨號	XG-X3332	生長特性	貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

運(yùn)輸和保存：

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

商品信息：

名稱產(chǎn)品	chang liver人宮頸癌細(xì)胞	產(chǎn)品別稱	chang liver；人張氏肝細(xì)胞
種屬	人	生長特性	貼壁生長
培養(yǎng)基	89%MEM+10%FBS+1%PS	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
貨號	XG-X3332	組織來源	肝

細(xì)胞別稱：chang liver；人張氏肝細(xì)胞

年齡性別：

背景簡介：張氏肝細(xì)胞1954年從非惡性的人體組織中建立。廣泛應(yīng)用于病毒學(xué)、生化和惡性腫瘤相關(guān)的轉(zhuǎn)移研究。 ATCC通過同工酶分析、HeLA標(biāo)記染色體和DNA指紋法分析，認(rèn)為它的起源是HeLa細(xì)胞污染的。

生物安全等級：2

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測：無

基因表達(dá)情況：The cells produce a C Type retrovirus. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.

保藏機(jī)構(gòu)：ATCC; CCL-13 ECACC; 88021102

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

chang liver人宮頸癌細(xì)胞

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

chang liver人宮頸癌細(xì)胞

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠破骨細(xì)胞	人P53(P53)檢測試劑盒elisa
REC-1細(xì)胞	人血管生成su樣蛋白4(ANGPTL4)試劑盒ELISA
RT4-D6P2T細(xì)胞	大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)試劑盒 ELISA
SBC-3細(xì)胞	鰓霉屬通用PCR試劑盒
RERF-LC-Ad1細(xì)胞	唾液乳suan桿菌PCR試劑盒
RERF-LC-Ad2細(xì)胞	新兇手弗朗西斯菌PCR檢測試劑盒
RERF-LC-AI細(xì)胞	環(huán)孢子蟲PCR檢測試劑盒
RERF-LC-MS細(xì)胞	遲鈍愛德華菌PCR試劑盒
RKN細(xì)胞	羊痘病毒PCR試劑盒
RKO-E6細(xì)胞	幽門螺旋桿菌PCR檢測試劑盒
RL細(xì)胞	腸侵襲性大腸桿菌PCR試劑盒
RMG-I細(xì)胞	赤羽病病毒（AKAV)PCR檢測試劑盒（熒光-PCR法）
RMUG-S細(xì)胞	鸚鵡熱嗜衣原體PCR試劑盒
RPMI6666細(xì)胞	chang liver人宮頸癌細(xì)胞馬虻PCR檢測試劑盒
RPMI-8866細(xì)胞	蛙皮suELISA試劑盒

細(xì)胞處理：

1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。