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貨號	XG-X3333	生長特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣	用途	僅供科研研究實驗

一、細(xì)胞基本屬性

細(xì)胞名稱	HeLa.S3人宮頸癌細(xì)胞
細(xì)胞別稱	HeLa s3; HeLa-S3; HELA-S3; HeLa/S3; HeLa.S3; HeLa S 3; HeLa S-3; HeLaS3; S3-HeLa; S3 HeLa；人宮頸癌細(xì)胞
種屬來源	人
商品貨號	XG-X3333

細(xì)胞別稱：HeLa s3; HeLa-S3; HELA-S3; HeLa/S3; HeLa.S3; HeLa S 3; HeLa S-3; HeLaS3; S3-HeLa; S3 HeLa；人宮頸癌細(xì)胞

種屬來源：人

年齡性別：31歲

組織來源：子宮

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

背景簡介：Hela S3細(xì)胞是1955年由Puck TT, Marcus PI和Cieciura SJ建系的，含HPV-18序列；角蛋白陽性；可用于與染色體突變、細(xì)胞營養(yǎng)、集落形成相關(guān)的哺乳動物細(xì)胞的克隆分析。

生物安全等級：2 [Cells contain human papilloma virus (HPV-18)]

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測：無

基因表達情況：

保藏機構(gòu)：ATCC; CCL-2.2 ATCC; CRL-7924 DSMZ; ACC-161 ECACC; 87110901 ；中國典型培養(yǎng)物保藏中心細(xì)胞庫

培養(yǎng)基：90%F-12K+10% FBS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存

倍增時間：~48 hours

STR鑒定位點Amelogenin：X；CSF1PO：9，10；D13S317：13.3；D16S539：9，10；D18S51：16；D19S433：13，14；D21S11：27，28；D2S1338：17；D3S1358：15，18；D5S818：11，12；D7S820：8，12；D8S1179：12，13；FGA：18，21；TH01：7；TPOX：8，12；vWA：16，18；

HeLa.S3人宮頸癌細(xì)胞

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；

b、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

c、棄上清，沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，最后放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

d、待細(xì)胞貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進行換液培養(yǎng)或傳代。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；

b、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

c、用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；

d、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。

HeLa.S3人宮頸癌細(xì)胞

公司正在出售的產(chǎn)品：

人髂動脈內(nèi)皮細(xì)胞	人細(xì)胞周期suD3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒
SBC-5細(xì)胞	人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)檢測試劑盒elisa
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SK-MEL-5細(xì)胞	塞皮克病毒RT-PCR試劑盒
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SCC-4細(xì)胞	弗朗西斯菌通用PCR檢測試劑盒
SCH細(xì)胞	鯉皰疹病型PCR檢測試劑盒
SET-2細(xì)胞	齒瓣石斛PCR試劑盒
SH-10-TC細(xì)胞	羊布氏桿菌PCR試劑盒
SH-4細(xì)胞	幽門螺旋桿菌(HP)核suan檢測試劑盒
SJRH30細(xì)胞	腸球菌通用PCR檢測試劑盒
SK-CO-1細(xì)胞	出血性大腸桿菌O:H(EHEC O)核suan檢測試劑盒
SK-ES-1細(xì)胞	鸚鵡熱嗜衣原體PCR檢測試劑盒
SKG-IIIa細(xì)胞	HeLa.S3人宮頸癌細(xì)胞杰米斯頓病毒PCR檢測試劑盒
SKG-M細(xì)胞	唾液過氧化物meiELISA試劑盒

三、培養(yǎng)注意事項

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議 1：2 傳代。

9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。