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當前位置:上海西格生物科技有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> 大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞
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產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-10-21 14:42:51瀏覽次數(shù):105次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線公司產(chǎn)品采用干冰運輸,經(jīng)過逐步的降溫,冷藏在-196℃度的液氮罐中,暫時停止其生命活動,保存其活性,使您的實驗更生動,公司代理品牌有:ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞 | 5×105 | XG-X6539 |
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基,使293T細胞懸浮生長。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
Ribonucleic acid酮中苯醚菊酯標準品anti- Chromogranin A antibody小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒
Ribonuclease A酮中特津標準品anti- Chromogranin B antibody小鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒
Solvent black 7苯/環(huán)己烷(1:1)中特津標準品anti- CHST1 antibody小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒
Acid Black 2腈中特津標準品anti- CHST10 antibody小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒
Nickel oxide醇中西草凈溶液標準物質(zhì)anti- CHST11 antibody小鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒
MERCURY(II) IODIDE正己烷中辛硫標準品anti- CHST12 antibody小鼠型肝炎核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒
MERCURY(II) SULFIDE正己烷中辛硫標準品anti- CHST13-Specific antibody小鼠型肝炎e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒
NA腈中辛硫標準品anti- CHST14 antibody小鼠型肝炎e抗原(HBeAg)ELISA試劑盒
大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞Human CCT5 (T-complex 1 protein subunit epsilon) ELISA kit酸化信號轉(zhuǎn)導功能蛋白DAB2抗體anti- SH2D1A antibody唾液酸結合Ig樣凝集素2(SIGLEC2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CCT6A (T-complex 1 protein subunit zeta) ELISA kit防御素β2抗體anti- SH2D1B antibody胰高血糖素(GC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human TWEAK (Tumour Necrosis Factor Related Weak Inducer of Apoptosis) ELISA Kit雙酶1/狀腺酶1抗體anti- SH2D2A antibodyB-細胞激活因子(BAFF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human TSGF (Tumor Specific Growth Facter/Tumor Supplied Group of Factor) ELISA Kit雙酶成熟因子抗體anti- SH2D3A antibody載脂蛋白A4(APOA4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human TSTA (Tumor Specific Transplantation Antigen) ELISA Kit/蛋白激酶DCAMKL1抗體anti- SH2D3C antibody封閉蛋白3(CLDN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human TAA (Tumor Associated Antigen) ELISA Kit唐氏綜合征細胞粘附分子抗體anti- SH2D4A antibody脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human NEB (Noradrenaline Bitartas) ELISA Kit雙特異性蛋白酸酶6/絲裂原活化蛋白激酶酸酶3抗體anti- SH2D5 antibody果糖二酸醛縮酶C(ALDOC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human RAG-1 (Recombination Activating Gene 1) ELISA Kit脂蛋白受體Dab1抗體anti- SH3BGR antibody雙特異性酸酶5(DUSP5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
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