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當前位置:上海西格生物科技有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> 大鼠支氣管成纖維細胞
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廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-10-21 14:42:51瀏覽次數(shù):117次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線產(chǎn)品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠支氣管成纖維細胞 |
規(guī)格 | 5×105 |
貨號 | XG-X6540 |
培養(yǎng)步驟:
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
3-[(6-Deoxy-alpha-L-mannopyranosyl)oxy]-2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-4H-benzopyran-4-one苯中順式氯菊酯標準品anti- CHST15 antibody小鼠型肝炎表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒
Acid Red 94醇中烯菌核利標準品anti- CHST3 antibody小鼠二胺酶(DAO)ELISA試劑盒
CIS-11-EICOSENOIC ACID METHYL ESTER正己烷中烯菌核利標準品anti- CHST8 antibody小鼠型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒
Glutathione正己烷中烯菌核利標準品anti- CHST9 antibody小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA試劑盒
beta-Nicotinamide adenine dinucleotide disodium salt正己烷中烯菌核利標準品anti- CHSY1 antibody小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒
BETA-NADPH TETRASODIUM SALT苯中烯菌核利標準品anti- CHT1 antibody小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒
(Bromomethyl)cyclopropane醇中基異柳標準品anti- CHTF18 antibody小鼠(trypsin)ELISA試劑盒
Cyclopropyl methyl ketone正己烷中基異柳標準品anti- CHURC1 antibody小鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒
大鼠支氣管成纖維細胞Human RAG-2 (Recombination Activating Gene 2) ELISA Kit酸化脂蛋白受體Dab1抗體anti- SH3BGRL2 antibody高遷移率族AT Hook蛋白1(HMGA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CDK1 (Cyclin Dependent Kinase 1) ELISA Kit同源轉錄因子DLX2抗體anti- SH3BP1 antibody高遷移率族AT Hook蛋白2(HMGA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CDK2 (Cyclin Dependent Kinase 2) ELISA Kit轉運蛋白DISP2抗體anti- SH3BP4 antibody己糖激酶2(HK2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CDK4 (Cyclin Dependent Kinase 4) ELISA KitDHX螺旋酶抗體anti- SH3BP5 antibody蛋白酸酶ⅣA3(PTPⅣA3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CDK5 (Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit肌營養(yǎng)蛋白α抗體anti- SH3D19 antibodyCREB調(diào)節(jié)轉錄輔激活因子3(CRTC3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CDK7 (Cyclin Dependent Kinase 7) ELISA Kit視神經(jīng)細胞相關蛋白/早老素結合蛋白抗體anti- SH3GL1 antibody環(huán)指蛋白39(RNF39)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CDK9 (Cyclin Dependent Kinase 9) ELISA Kit胞質(zhì)分裂專一蛋白7抗體anti- SH3GL2 antibody組胺H4受體(HRH4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CDKN2A (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit環(huán)指蛋白19抗體anti- SH3GL3 antibody組胺H4受體(HRH4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
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