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當前位置:上海西格生物科技有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> 大鼠角膜上皮細胞
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產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-10-21 15:19:51瀏覽次數(shù):139次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線產(chǎn)品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠角膜上皮細胞 |
規(guī)格 | 5×105 |
貨號 | XG-X6597 |
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
注意事項:
1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
Luteolin拌亞砜anti- Cyclophilin B-specific antibody大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA試劑盒
LIGNIN, ALKALI硫威亞砜anti- Cyclophilin E antibody大鼠酰膽酯酶(AChE)ELISA試劑盒
NA全自動生化分析儀檢定用標準物質(zhì)anti- CYFIP2 antibody大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒
MolybdenuM酮威anti- cygb antibody大鼠總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒
meso-2,3-Dibromosuccinic acid氯氟醚菊酯anti- CYLC2 antibody大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒
MESOPORPHYRIN IX DIHYDROCHLORIDE氯氟菊酯anti- CYLD antibody大鼠結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒
Sodium溴蟲腈/蟲螨腈(GBW(E)081180)anti- CYP11A1 antibody大鼠釋放激素受體抗體(GNRHR-Ab)ELISA試劑盒
CI 51180虱螨脲anti- CYP11B2 antibody大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試劑盒
大鼠角膜上皮細胞dried酸化內(nèi)皮細胞受體蛋白激酶A3+A4+A5抗體anti- ST8SIA1 antibody轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFβ3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..E選擇素抗體anti- ST8SIA2-Specific antibodyDicer酶1(DICER1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
freeze-dried風疹病糖蛋白抗體anti- ST8SIA3 antibody腦多巴胺神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
freeze-dried雌激素受體α抗體anti- STAC antibody神經(jīng)肽FF(NPFF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Penicillium thomii Maire, anamorph電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白α抗體anti- STAC2 antibody血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Chaetomium tenuissimum Sergejeva, teleomorph前列腺素E受體蛋白4抗體anti- STAC3 antibody孕烷X受體(PXR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Homo sapiens, humanEFR3A蛋白抗體anti- STAG1 antibody環(huán)合物水解酶4(EPHX4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Salmonella enterica subsp.enterica (e ..ENAH蛋白抗體anti- STAG2 antibody肌肉酸果糖激酶(PFKM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
培養(yǎng)步驟:
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
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