磁珠

保存條件：室溫，室溫較高時（夏季）可酌情冷藏，禁止冷凍?？杀４?18 個月。
產(chǎn)品介紹：
磁珠法核酸純化技術(shù)采用了納米級磁珠微珠，這種磁珠微珠的表面標(biāo)記了一種官能團，能同核酸發(fā)生吸附反應(yīng)。 使
用磁珠法來純化核酸的就是自動化，磁珠在磁場條件下可以發(fā)生聚集或分散，從而可擺脫離心等所需的
手工操作流程。
本品主要用來提核酸（DNA/RNA）提取，產(chǎn)物純化等實驗，配合磁力架或核酸自動提取儀（磁珠法）使用。
產(chǎn)品參數(shù)：

使用說明：
1. 如有冷藏情況，使用前務(wù)必室溫平衡；
2. 本產(chǎn)品使用前需混合均勻，倒置后瓶底應(yīng)無明顯沉淀；
3. 每個反應(yīng)的磁珠用量為 10-50 μl（根據(jù)實驗要求或具體說明書調(diào)整用量）；
4. 根據(jù)樣本的不同，本產(chǎn)品在吸附核酸時，會有結(jié)團現(xiàn)象。請在吸附、洗滌和洗脫的步驟，充分震蕩混勻，使其充
分懸浮；尤其是洗脫步驟，一定要將結(jié)團打散（可渦旋震蕩或吹吸），否則影響洗脫效率；
5. 上機自動化操作時，磁吸時間建議不低于 30 秒。(推薦使用BMT-96E全自動核酸提取儀/BMT-32E全自動核酸提取
儀。)

一、模板DNA：PCR反應(yīng)需要模板DNA，如從細(xì)胞、組織、血液中提取DNA等；

二、引物：PCR反應(yīng)的兩個引物，分別與模板DNA的兩端配對擴增所需的特定區(qū)域，引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物；

三、dNTPs：PCR反應(yīng)中需要四種dNTPs，包括脫氧腺苷酸（dATP）、脫氧胸苷酸（dCTP）、脫氧鳥苷酸（dGTP）、脫氧胞嘧啶酸（dTTP），用于細(xì)胞分裂、DNA合成         等生物學(xué)過程，用于PCR擴增的模板DNA鏈的延伸和擴增；

四、Taq DNA聚合酶：PCR反應(yīng)需要的聚合酶，一般使用Taq聚合酶，還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等，用于擴增DNA鏈；

五、PCR buffer溶液：對PCR反應(yīng)具有緩沖作用，調(diào)節(jié)反應(yīng)pH，硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機化合物如甲醛，可增強PCR反應(yīng)特異性，從而提高反應(yīng)效率；

六、酶切體系：PCR擴增往往涉及到重組、構(gòu)建和測序等等實驗步驟，常常需要進(jìn)行酶切操作。

七、MARK:一種分子量標(biāo)準(zhǔn)，用來判別DNA片段大小的工具。

八、DNA純化試劑盒：用于純化PCR反應(yīng)產(chǎn)物；

①Oligo dT
選擇Oligo dT時，要求RNA必須有Poly A，所以真核生物的mRNA都適用。適合長鏈甚至全長mRNA的RT，對RNA樣品的質(zhì)量要求較高，不要有明顯的DNA污染、RNA降解和RNA斷裂。假如想探索新的mRNA進(jìn)行RT反應(yīng)，建議推薦使用Oligo dT引物。使用Oligo dT引物要比隨機引物和特異性引物的穩(wěn)定性要好。
②隨機引物
適合各種RNA的RT，尤其適合模板豐度很低的情況（比如某個gene表達(dá)量很低）。選擇隨機引物時，鏈cDNA合成反應(yīng)中就是以所有的RNA為模板，然后進(jìn)行PCR反應(yīng)時設(shè)計引物進(jìn)行特異性擴增。同時要注意隨機引物的量和總RNA量之間的關(guān)系，一般建議每5µg總RNA的隨機引物的用量為50ng，如果每5µg總RNA的隨機引物的用量超過250ng，可能會導(dǎo)致小片段產(chǎn)物（＜500bp）的增加和長片段、全長產(chǎn)物的降低。
③特異性引物
基因特異性引物（GSP）是某個基因序列的一部分，與模板互補的引物。該引物需要結(jié)合目標(biāo)RNA的已知序列進(jìn)行設(shè)計。由于引物和RNA序列特異性結(jié)合，每個目標(biāo)RNA都需要一套新的基因特異性引物。因此，當(dāng)分析多種目標(biāo)時，則需要適用更多的RNA樣本。而且不同引物退火溫度本來就不相同，所以一般不推薦使用。如需要使用特異性引物，建議對退火溫度進(jìn)行優(yōu)化。