傅經(jīng)理
黑色素染色
一、 實(shí)驗(yàn)步驟
1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無(wú)水乙醇Ⅰ5min-無(wú)水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來(lái)水洗,蒸餾水浸洗3-5遍。
2、工作液配制:取硝酸10ml,逐滴加入濃氨水至產(chǎn)生沉淀后,繼續(xù)滴加氨水,邊滴邊搖動(dòng),使產(chǎn)生的沉淀又復(fù)溶解,溶液變清。再滴入硝銀數(shù)滴使溶液呈輕微混濁,zuihou加入蒸餾水20ml,過(guò)濾后即可使用。
3、工作液孵育:切片浸入銀氨液并加蓋,置于4℃避光反應(yīng)12-18h,蒸餾水洗3遍。
4、硫代酸鈉處理:硫代硫鈉快速處理幾秒,流水沖洗5min。
5、復(fù)染VG:將飽和kuweisuan與酸性品紅9:1混合成VG染液,染1-3min,快速水洗,無(wú)水乙醇三缸快速脫水。
透明封片:干凈的二甲苯透明1-5min,中性樹膠封片。
7、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。
二、結(jié)果判讀:
黑色素、親銀細(xì)胞胞質(zhì)呈黑色,膠原纖維呈紅色,肌纖維和紅細(xì)胞呈黃色。
三、注意事項(xiàng):
1、配工作液和孵育時(shí)用的容器,在用之前必須用蒸餾水清洗干凈,否則易出現(xiàn)雜質(zhì)和沉淀。
黑色素染色