傅經(jīng)理
人蛋白酶抑制因子3(SERPINA3)ELISA試劑盒
Human SERPINA3 ELISA Kit
產(chǎn)品貨號:ZC-55295
樣本收集方法:
1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時或2-8℃過夜后于1000×g離心20分鐘,
取上清即可檢測,收集血液的試管應(yīng)為一次性的無內(nèi)毒素試管。
2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA鈉鹽,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1: 9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9 mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎或反復(fù)凍融。后將勻漿液5000×g離心 5-10分鐘,取上清檢測。
4. 細(xì)胞提取液:貼壁細(xì)胞用冷的PBS輕輕清洗,然后用消化,1000×g離心5分鐘后收集細(xì)胞;懸浮細(xì)胞可直接離心收集。收集的細(xì)胞用冷的PBS 洗滌3次。每 1×106 個細(xì)胞中加入150-200μL PBS重懸并通過反復(fù)凍融使細(xì)胞破碎(若含量很低可減少PBS的體積)。將提取液于1500×g離心10分鐘,取上清檢測。
5. 細(xì)胞培養(yǎng)上清或其他生物體液: 1000×g 離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測。
人蛋白酶抑制因子3(SERPINA3)ELISA