傅經(jīng)理
產(chǎn)品品牌:ZCIBIO(茁彩生物)
產(chǎn)品名稱: 大鼠粘膠蛋白;肌腱蛋白C(TN-C)ELISA試劑盒
英文名稱:Rat TN-C ELISA kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
實(shí)驗(yàn)樣本:血清、血漿、組織、細(xì)胞上清或其他生物樣本
大鼠粘膠蛋白;肌腱蛋白C(TN-C)ELISA試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域:僅供科研實(shí)驗(yàn)使用,不得用于臨床診斷
我的標(biāo)準(zhǔn)曲線是平的或者是非線性的,這可能是由于什么原因引起的?
引起不理想的標(biāo)準(zhǔn)曲線的原因有很多,常見(jiàn)的原因例舉如下:
◆ 確定稀釋是否得當(dāng)。
◆ 確定波長(zhǎng)是否正確。
◆ 標(biāo)準(zhǔn)品和樣品必需在15-20分鐘內(nèi)滴加入板內(nèi)。(除非試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)特別說(shuō)明)
◆ 檢查背景是否過(guò)高。
◆ 確定酶標(biāo)板是否正確洗滌。 不恰當(dāng)?shù)南礈炜赡軙?huì)引起具有高背景的平直曲線。
◆ 在測(cè)定過(guò)程中重復(fù)讀板。在超過(guò)建議時(shí)間后讀板會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
◆ 如果高的標(biāo)準(zhǔn)品的讀數(shù)超過(guò)了酶標(biāo)儀的范圍,確定標(biāo)準(zhǔn)品是否正確溶解,孵育時(shí)間和溫度是否準(zhǔn)確。
◆ 為保證實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性請(qǐng)重復(fù)測(cè)定。
◆ 如果使用對(duì)照,對(duì)照的濃度必須在測(cè)定范圍內(nèi)。
◆ 在檢測(cè)和孵育過(guò)程中確定試劑沒(méi)有被污染。
◆ 沒(méi)有任何信號(hào)的平直標(biāo)準(zhǔn)曲線可能是由于酶結(jié)合物或者底物沒(méi)有反應(yīng)。 檢查各個(gè)操作過(guò)程
◆ 由于許多酶標(biāo)儀的限制,因此建議標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)由高向低做復(fù)孔。
移液技術(shù)
1. 移液時(shí),槍頭應(yīng)對(duì)準(zhǔn)孔中央,避免接觸孔壁及底部。
2. 移液后輕輕晃動(dòng)混勻試劑。
3. 如果您的樣品具有黏性,請(qǐng)預(yù)先潤(rùn)洗槍頭以消除表面張力的影響。吸液時(shí)等待片刻使體積平衡后再取出。
4. 移液不充分或移液體積不均,說(shuō)明移液器需要校正。必要時(shí)請(qǐng)檢查移液器并重新校正。
5. 加樣時(shí),不同的試劑標(biāo)準(zhǔn)品和樣本間都要確保更換槍頭,避免交叉污染。
6. 確保使用合適的槍頭。不合適的槍頭無(wú)法正確量取吸液和加樣的體積。
我是否可以更改底物處理的方法?
◆ 如果反應(yīng)物溶液需要混合,確保加入的反應(yīng)物試劑體積正確并充分混合?;旌虾蟮娜芤罕匦柙?5分鐘內(nèi)使用(化學(xué)發(fā)光檢測(cè)多4小時(shí))。如果反應(yīng)物混合得太早,則在容器中的顏色可能會(huì)發(fā)生變化。
◆ 如果底物是凍干品或片劑,則根據(jù)說(shuō)明書(shū)中的方法用適當(dāng)體積的稀釋液將其*溶解。混合*后并在說(shuō)明書(shū)中推薦的時(shí)間內(nèi)使用。
我在移液的時(shí)候是否要按照一定的順序?
◆ 根據(jù)說(shuō)明書(shū)中的順序進(jìn)行移液操作。
◆ 高靈敏度檢測(cè)利用了放大系統(tǒng)。在底物孵育完成之后,按照加底物的順序依次加入放大試劑。
◆ 底物加完之后,輕拍酶標(biāo)板使其充分混合。
底物有可能被污染嗎?
◆ 是的。如果測(cè)定時(shí)使用的是堿性磷酸酶或者辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的結(jié)合物,在測(cè)定時(shí)要注意避免污染。污染可能會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)生超過(guò)酶標(biāo)儀范圍的值。避免與金屬或氧化試劑接觸。使用新容器。
底物是否需要在黑暗環(huán)境中進(jìn)行孵育?
◆ 不需要。不過(guò)在孵育過(guò)程中應(yīng)避免陽(yáng)光直射。
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