傅經(jīng)理
產(chǎn)品品牌:ZCIBIO(茁彩生物)
產(chǎn)品名稱:大鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒
英文名稱:Rat ECPELISA kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
實驗樣本:血清、血漿、組織、細胞上清或其他生物樣本
大鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域:僅供科研實驗使用,不得用于臨床診斷
我的標準曲線是平的或者是非線性的,這可能是由于什么原因引起的?
引起不理想的標準曲線的原因有很多,常見的原因例舉如下:
◆ 確定稀釋是否得當。
◆ 確定波長是否正確。
◆ 標準品和樣品必需在15-20分鐘內(nèi)滴加入板內(nèi)。(除非試劑盒內(nèi)說明書特別說明)
◆ 檢查背景是否過高。
◆ 確定酶標板是否正確洗滌。 不恰當?shù)南礈炜赡軙鹁哂懈弑尘暗钠街鼻€。
◆ 在測定過程中重復讀板。在超過建議時間后讀板會導致錯誤的結(jié)果。
◆ 如果高的標準品的讀數(shù)超過了酶標儀的范圍,確定標準品是否正確溶解,孵育時間和溫度是否準確。
◆ 為保證實驗準確性請重復測定。
◆ 如果使用對照,對照的濃度必須在測定范圍內(nèi)。
◆ 在檢測和孵育過程中確定試劑沒有被污染。
◆ 沒有任何信號的平直標準曲線可能是由于酶結(jié)合物或者底物沒有反應(yīng)。 檢查各個操作過程
◆ 由于許多酶標儀的限制,因此建議標準品檢測由高向低做復孔。
移液技術(shù)
1. 移液時,槍頭應(yīng)對準孔中央,避免接觸孔壁及底部。
2. 移液后輕輕晃動混勻試劑。
3. 如果您的樣品具有黏性,請預先潤洗槍頭以消除表面張力的影響。吸液時等待片刻使體積平衡后再取出。
4. 移液不充分或移液體積不均,說明移液器需要校正。必要時請檢查移液器并重新校正。
5. 加樣時,不同的試劑標準品和樣本間都要確保更換槍頭,避免交叉污染。
6. 確保使用合適的槍頭。不合適的槍頭無法正確量取吸液和加樣的體積。
我是否可以更改底物處理的方法?
◆ 如果反應(yīng)物溶液需要混合,確保加入的反應(yīng)物試劑體積正確并充分混合?;旌虾蟮娜芤罕匦柙?5分鐘內(nèi)使用(化學發(fā)光檢測多4小時)。如果反應(yīng)物混合得太早,則在容器中的顏色可能會發(fā)生變化。
◆ 如果底物是凍干品或片劑,則根據(jù)說明書中的方法用適當體積的稀釋液將其*溶解?;旌?后并在說明書中推薦的時間內(nèi)使用。
我在移液的時候是否要按照一定的順序?
◆ 根據(jù)說明書中的順序進行移液操作。
◆ 高靈敏度檢測利用了放大系統(tǒng)。在底物孵育完成之后,按照加底物的順序依次加入放大試劑。
◆ 底物加完之后,輕拍酶標板使其充分混合。
底物有可能被污染嗎?
◆ 是的。如果測定時使用的是堿性磷酸酶或者辣根過氧化物酶標記的結(jié)合物,在測定時要注意避免污染。污染可能會導致產(chǎn)生超過酶標儀范圍的值。避免與金屬或氧化試劑接觸。使用新容器。
底物是否需要在黑暗環(huán)境中進行孵育?
◆ 不需要。不過在孵育過程中應(yīng)避免陽光直射。
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