傅經(jīng)理
產(chǎn)品品牌:ZCIBIO(茁彩生物)
產(chǎn)品名稱:人前列腺素D合成酶(PTGDS)ELISA試劑盒
英文名稱:Human PTGDS ELISA kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
實驗樣本:血清、血漿、組織、細(xì)胞上清或其他生物樣本
應(yīng)用領(lǐng)域:人前列腺素D合成酶(PTGDS)ELISA試劑盒僅供科研實驗使用,不得用于臨床診斷
我的標(biāo)準(zhǔn)曲線是平的或者是非線性的,這可能是由于什么原因引起的?
引起不理想的標(biāo)準(zhǔn)曲線的原因有很多,常見的原因例舉如下:
◆ 確定稀釋是否得當(dāng)。
◆ 確定波長是否正確。
◆ 標(biāo)準(zhǔn)品和樣品必需在15-20分鐘內(nèi)滴加入板內(nèi)。(除非試劑盒內(nèi)說明書特別說明)
◆ 檢查背景是否過高。
◆ 確定酶標(biāo)板是否正確洗滌。 不恰當(dāng)?shù)南礈炜赡軙鹁哂懈弑尘暗钠街鼻€。
◆ 在測定過程中重復(fù)讀板。在超過建議時間后讀板會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
◆ 如果高的標(biāo)準(zhǔn)品的讀數(shù)超過了酶標(biāo)儀的范圍,確定標(biāo)準(zhǔn)品是否正確溶解,孵育時間和溫度是否準(zhǔn)確。
◆ 為保證實驗準(zhǔn)確性請重復(fù)測定。
◆ 如果使用對照,對照的濃度必須在測定范圍內(nèi)。
◆ 在檢測和孵育過程中確定試劑沒有被污染。
◆ 沒有任何信號的平直標(biāo)準(zhǔn)曲線可能是由于酶結(jié)合物或者底物沒有反應(yīng)。 檢查各個操作過程
◆ 由于許多酶標(biāo)儀的限制,因此建議標(biāo)準(zhǔn)品檢測由高向低做復(fù)孔。
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入微生物化的目標(biāo)抗體,將未結(jié)合的s物素抗體洗凈后,加入HRP標(biāo)記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
1. 樣品收集后若在1周內(nèi)進行檢測的可保存于2-8℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1 個月內(nèi)檢測),或-80℃(3-6個月內(nèi)檢測),避免反復(fù)凍融。
2. 試劑盒檢測范圍不等同于樣本的濃度范圍,如果您的樣品中檢測物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品高值,請根據(jù)實際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議查閱文獻后先做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù))。
3. 若所檢樣本不在說明書所列樣本之中,建議做預(yù)實驗驗證其檢測有效性。
4. 若使用化學(xué)裂解液制備組織勻漿或細(xì)胞提取液,由于引入某些化學(xué)物質(zhì)會導(dǎo)致ELISA測值出現(xiàn)偏差。
5. 若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在不被檢出情況。
6. 某些重組蛋白可能與試劑盒中捕獲或檢測抗體不匹配而出現(xiàn)不被檢出的情況.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
從今日起,凡購買上海茁彩生物品牌的Elisa試劑盒,均可提供免費待測服務(wù),為您提供專業(yè)的指導(dǎo),在Elisa實際操作過程中,如遇到任何問題均可咨詢。
人前列腺素D合成酶(PTGDS)ELISA試劑盒