檢測原理

將目標抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的目標連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入辣根過氧化物酶標記的抗體，將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計算樣品濃度。

▎  特異性

可檢測樣本中的Decorin , 且與其它類似物無明顯交叉反應(yīng)。

▎  重復(fù)性

板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。

▎  批內(nèi)差

取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測，每份樣本連續(xù)測定20次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。

▎  批間差

選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值

精密度

精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV（%）=SD/mean×100  CV<10% Inter-批間差: CV<13%

穩(wěn)定性

經(jīng)測定，試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。

▎  實驗所需自備物品

1、450±10nm濾光片酶標儀（建議儀器使用前預(yù)熱）  

2、高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.  

3、Eppendorf 移液器.  

4、蒸餾水或去離子水.  

5、脫脂棉吸水紙.  

6、37℃恒溫箱.  

7、100ml和1000ml量筒.

小鼠核心蛋白聚糖(Decorin)ELISA試劑盒