傅經(jīng)理
大鼠微管相關(guān)蛋白輕鏈3(LC3)ELISA試劑盒檢測原理
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體,將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
反應(yīng)類型 | 雙抗夾心法 |
規(guī)格 | 96T/48T |
中文名稱 | 大鼠微管相關(guān)蛋白輕鏈3(LC3)ELISA試劑盒 |
反應(yīng)時間 | 1.5 h |
檢測方法 | 酶聯(lián)免疫吸附測定 |
檢測范圍 | |
靈敏度 | |
上樣體積 | 50 μL/孔 |
樣本類型 | 血清、血漿、組織、細(xì)胞上清或其他生物樣本 |
▎ 重復(fù)性
板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%。
▎ 批內(nèi)差
取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
▎ 批間差
選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值
精密度
精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%)=SD/mean×100 CV<10% Inter-批間差: CV<13%
穩(wěn)定性
經(jīng)測定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進(jìn)行操作可減少人為誤差。