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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>土壤系列>> 錳過氧化物酶(MnP)測試盒可見分光光度法

錳過氧化物酶(MnP)測試盒可見分光光度法
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參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
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更新時間:2023-12-11 21:13:13瀏覽次數(shù):583評價

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貨號 BK-01S6947
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實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

錳過氧化物酶(MnP)測試盒可見分光光度法

50管/48樣

可見分光光度法

BK-01S6947

商品介紹:

測定意義:

錳過氧化物酶(EC1.11.1.13)是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶,主要存在于擔(dān)子菌中,屬于木質(zhì)素降解酶系,能有效的降解木質(zhì)素及廢水和土壤中比較難降解的氯化物,疊氮化合物、DTT,多環(huán)芳烴等。

測定原理

錳過氧化物酶在Mn2+存在的條件下,將愈創(chuàng)木酚氧化為四鄰甲氧基連酚,在465nm有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

2 ug pBiFC-bFosVC155 pBiFC-bFosVC155 低溫運輸,-20℃保存

1.5mL 三合一RNA上樣液 (含EB)  RNAON  -20℃保存

2 ug pACT pACT 低溫運輸,-20℃保存

硫乙醇酸鹽流體(2015藥典)  250g

1瓶 BT-549細胞株 BT-549 低溫運輸和保存

大豆酪蛋白消化物(USP)顆粒 Soybean Casein Digest Medium 250g

1g  B12 Vitamin B12 4℃避光保存

1000mL PBS-Tween-20 Solution,20X  PBS-Tween-20 Solution,20X  常溫保存

20次 高效農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞制備試劑盒  

2 ug pNG_v2 pNG_v2 低溫運輸,-20℃保存

改良MS-H  1000g

錳過氧化物酶(MnP)測試盒可見分光光度法ETHE1  乙基丙二酸腦蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

GRO gamma/CXCL3  生調(diào)節(jié)致基因gamma(GROγ)抗體 規(guī)格: 0.1ml

RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S5)  磷酸化RNA聚合II CTD抗體 規(guī)格: 0.1ml

GFP  綠色熒光蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-CHEK1 (Ser345)  磷酸化細胞周期檢測點激1抗體 規(guī)格: 0.1ml

factor VIII(FVIII)  第八因子相關(guān)抗原抗體 規(guī)格: 0.1ml

Cadherin 10  鈣粘附分子10抗體 規(guī)格: 0.2ml

CD94/KLRD1  NK細胞表面抑制性受體CD94抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-ALK/CD246(Tyr1586)  磷酸化間變型激抗體 規(guī)格: 0.1ml

IL-28B/IL-28C  白細胞介素28B抗體 規(guī)格: 0.2ml

EGF(human)  表皮生因子抗體(人) 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360)  磷酸化核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體 規(guī)格: 0.1ml

 


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