目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50次漢坦病型PCR檢測試劑盒價(jià)格
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
漢坦病型PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Hantavirus 2(HV)2RTPCR | BK-P9238 |
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
LB肉湯/LB Broth用于細(xì)菌增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
金龜子綠僵菌小孢變種 Metarhizium anisopliae var. anisopliae釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基斯氏普羅菲登斯菌 Providencia stuartii
大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基苜蓿中華瘤菌
SMC-1(人胸膜瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
半固體瓊脂 規(guī)格: 250g 用途: 供細(xì)菌動力觀察、菌種保存,H抗原位相變異試驗(yàn)等。(美國FDA、SN、GB)
人脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基大豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
SK-Hep-1(人肝細(xì)胞)酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis
BIU-87(人膀胱細(xì)胞)酸球菌 Lactococcus lactis
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens
亞硫酸-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(chǔ)(SPS) 規(guī)格: 250g 用途: 用于食品和礦泉水中產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)(GB/T 8538-2008,GB/T4789.28-2003中4.69,GB/...
漢坦病型PCR檢測試劑盒價(jià)格Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人小細(xì)胞肺細(xì)胞 NCI-H446
小鼠白血病細(xì)胞 P388
浸液湯培養(yǎng)基/浸液湯/Meat Infusion Broth溶血性鏈球菌、蠟樣芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
假單胞P瓊脂/Pseudomonas Agar P銅綠(綠膿)假單胞菌色素生成試驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
PLET瓊脂基礎(chǔ)/多粘菌素B溶菌酶乙二胺四乙酸乙酸亞瓊脂基礎(chǔ)/PLET Agar Base炭疽桿菌的分離鑒別250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人肺泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 用于普通的或營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng),還用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室無菌程度的監(jiān)測及消毒劑消毒效果的...
蛋白胨水 (靛基質(zhì)培養(yǎng)基) 規(guī)格: 100g 用途: 供鑒別細(xì)菌能否產(chǎn)生靛基質(zhì)的生化反應(yīng)
半糖凝集素9(GAL9)重組蛋白 Recombinant Galectin 9 (GAL9)
滑行蛋白α(TXLNα)重組蛋白 Recombinant Taxilin Alpha (TXLNa)
熱休克蛋白47(HSP47)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein 47 (HSP47)
野鼠色基因相關(guān)蛋白(AGRP)重組蛋白 Recombinant Agouti Related Protein (AGRP)
HCT 116(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)