当着夫的面被夫上司玩弄,最近免费中文字幕中文高清百度 ,超碰CAOPORON入口,精品国产日韩一区二区三区

技術(shù)原理：
 DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

原理是由一對引物介導(dǎo)，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
?
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

植物維生素D(VD)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

植物維生素C(VC)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

植物維生素B6(VB6)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

植物維生素B12(VB12)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

植物維生素A(VA)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

植物滲調(diào)蛋白（Osmotins）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

植物茉莉酸甲酯（MeJA）ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

植物茉莉酸(JA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

植物激素脫落酸(ABA)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

植物過氧化物酶（POD）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

植物果膠酶(Pectinase) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

植物鈣調(diào)素(CAM)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

植物鈣調(diào)磷酸酶（CaN）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

植物脯氨酸(proline)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

牛茨城病病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗原 0.5mgphospho-KLF5/Krueppel-like factor 5 (pSer272)

N-鈣粘附分子抗原 0.5mgN-cadherin

腦啡肽 0.5mgPENK/Enkephalin A(Preproencephalin A)

突觸相關(guān)膜蛋白25抗原 0.5mgSNAP-25 (synaptosomal-associated protein 25)

上游刺激因子1抗原 0.5mgUSF-1(upstream stimulatory factor 1)

DR3 死亡受體（抗原） 0.5mgDR3/TRAMP (death receptor-3)

中分子量神經(jīng)絲蛋白（抗原） 0.5mgNF-M (Neurofilament triplet M)

干擾素-β抗原 0.5mgIFN- Beta (Interferon Beta)Anti-mouse,rat

雌二醇偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mgEstradiol/BSA

神經(jīng)保護肽 0.5mgNeuroprotective peptide/Gly-HN(Nuclear-encoded Humanin [HN(N)] Gly14)

熒光素標(biāo)記人IgM 0.3mlhuman IgM/FITC

熒光素PE標(biāo)記狗IgM 0.1mldog IgM/PE

熒光素Cy3標(biāo)記兔IgM 0.1mlRabbit IgM/Cy3

羅丹明標(biāo)記小鼠IgG(細胞流式同型對照) 0.3mlMouse IgG/RBITC

兔子轉(zhuǎn)化生長因子β 96TTGF- Beta (Rabbit Transforming Growth factor Beta) ELISA Kit