目錄:上海帛科生物技術有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50次等孢球蟲通用PCR檢測試劑盒規(guī)格
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
等孢球蟲通用PCR檢測試劑盒規(guī)格 | Isospora spp.PCR | BK-P9311 |
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
小鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
小鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
小鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
小鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
小鼠血管生長素(ANG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
小鼠血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
等孢球蟲通用PCR檢測試劑盒規(guī)格環(huán)指蛋白126抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:RNF126
核糖體S6激酶RSK2抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:Rsk2
Rho GTP酶激活蛋白GAP抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:RACGAP1
環(huán)指蛋白45/自分泌運動因子受體抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:RNF45
RRAD抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:RRAD
視網(wǎng)膜母細胞瘤結合蛋白P48抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:RbAp48
磷酸化受體結合絲氨酸蘇氨酸激酶2抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-RIP2 (Ser176)
固醇調節(jié)元件結合蛋白裂解激活蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:SCAP
溶質載體蛋白家族20成員2抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:SLC20A2
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶p38γ抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:phospho-SAPK3 (Thr183+Tyr185)
磷酸化外紡錘體極樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-Separase (Ser1073)
腫瘤壞死因子配體超家族成員12A抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:TNFRSF12A
轉錄因子相關蛋白TRRAP抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:TRRAP
抑癌蛋白TCHP抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:TCHP
磷酸化馬鈴薯球蛋白(結節(jié)性硬化)抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-Tuberin (Ser1254)