目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測(cè)試劑盒>> 50次瑪爾摩分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家
參考價(jià) | 面議 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2023-12-17 17:20:59瀏覽次數(shù):299評(píng)價(jià)
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是環(huán)保在線上看到的信息,謝謝!
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
瑪爾摩分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家 | Mycobacterium malmoenesPCR | BK-P9429 |
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
?
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
人凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人凝血酶血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物(T-TM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人凝血酶受體(TR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人凝血酶(TM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人凝聚素(CLU)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人凝膠原蛋白(gelson)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人尿游離皮質(zhì)醇(UFC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人尿微量白蛋白(ALB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
瑪爾摩分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家半胱氨酸亞磺酸脫羧酶抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:CSAD
20號(hào)染色體開放閱讀框160抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:C20orf160
卵巢癌抗原抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:CA125
CREB結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:CBP
3號(hào)染色體開放閱讀框34抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:C3Orf34
死亡相關(guān)蛋白5抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:DAP5
生殖細(xì)胞發(fā)育相關(guān)蛋白DAZL抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:DAZL
退行性精母細(xì)胞同源物1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:DEGS1
磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)神經(jīng)磷蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-DARPP32 (Thr34)
雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶1B抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:Dyrk1B
DLX4抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:DLX4
延伸因子EF-1δ抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:EEF1D
磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr968)
內(nèi)皮細(xì)胞的分化蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:EDG6
磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-EGFR(Tyr845)
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)