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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>光合作用系列>> 多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒可見分光光度法

多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒可見分光光度法
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更新時間:2023-12-23 21:04:30瀏覽次數(shù):630評價

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貨號 BK-01S7019
多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:PDP瓊脂進口、國產(chǎn)King Medium A250克綠膿菌色素測定發(fā)酵進口、國產(chǎn)Mannitol Ferment Medium250克腸道桿菌的鑒別,細菌發(fā)酵試驗普通肉湯瓊脂平板進口、國產(chǎn)Nutrient Agar Plate50塊一般細菌的培養(yǎng)和細菌總數(shù)的測定M-H瓊脂平板進口、國產(chǎn)M-H Agar Plate10塊

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒可見分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣

檢測方法:可見分光光度法

產(chǎn)品貨號:BK-01S7019

產(chǎn)品分類:光合作用系列
商品介紹:

測定意義:

多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.15)是一種細胞壁結(jié)合蛋白,可以催化果膠分子中α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解,參與果膠的降解,使細胞壁結(jié)構(gòu)解體,導致果實軟化,與果實成熟、葉和花的脫落、病原物防御,細胞伸展發(fā)育以及木質(zhì)化有關(guān),在植物抗病性和食品貯藏保鮮領(lǐng)域具有較高的研究價值。

測定原理:

多聚半乳糖醛酸酶水解果膠酸生成半乳糖醛酸,具有還原性醛基,與DNS試劑反應生成紅棕色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰,測定540nm處吸光值變化可計算得多聚半乳糖醛酸酶活性。

自備實驗用品及儀器:

天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

1 管 JM109大腸桿菌 JM109 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRLuc-N2 pRLuc-N2 低溫運輸,-20℃保存

100mL 病毒沉淀劑 Virus Precipitation Reagent 4℃保存

2 ug pcDNA3.1/V6-His B pcDNA3.1/V6-His B 低溫運輸,-20℃保存

0.1%呂氏堿性美藍染色液  5ml*6支/盒

1g 次甲基綠 Methyl Green B 常溫干燥保存

50T 牛副流感病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

5 mg CFDA SE (細胞增殖示蹤熒光探針) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

500mL Blotto in PBS  Blotto in PBS  常溫保存

1mL DNAcryl助沉劑 Acryl DNADOWN 4℃保存

2 ug pGL4.17 pGL4.17 低溫運輸,-20℃保存

多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒可見分光光度法SUPT16H/CDC68  染色體特異性轉(zhuǎn)錄延伸因子抗體 規(guī)格: 0.2mlHIF-1 Alpha  缺氧誘導因子1α 抗體HIF-1α 規(guī)格: 0.1ml

SHC3  SH2結(jié)構(gòu)域蛋白C3抗體 規(guī)格: 0.2mlADAMTS10  整合素樣金屬蛋白與凝10型抗體 規(guī)格: 0.1ml

Collagen III  抗Ⅲ型膠原抗體 規(guī)格: 0.1mlDonkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

C20orf195  20號染色體開放閱讀框195抗體 規(guī)格: 0.2mlATG16L2  自噬體ATG16L2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

RARRES1/TIG1  受體應答蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1mlProteasome 19S S7  蛋白體PRS7抗體 規(guī)格: 0.2ml

OCT2  陽離子轉(zhuǎn)運蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-ERK1+ERK2(Thr185+Tyr187+Thr202+Tyr204)  磷酸化絲裂原活化蛋白激ERK抗體 規(guī)格: 0.1ml

HDHD2/IER3IP1  HDHD2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

ZNRF1  鋅指/環(huán)指蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

OLFM1  嗅球蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

KY/Kyphoscoliosis peptidase  脊柱側(cè)后凸畸形肽抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

RAR gamma/Retinoic Acid Receptor gamma  維甲酸受體γ抗體 規(guī)格: 0.2ml 

 


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