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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>維生素系列>> 維生素B6測(cè)試盒可見分光光度法

維生素B6測(cè)試盒可見分光光度法
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貨號(hào) BK-01S6993
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商品介紹:

測(cè)定意義:

維生素B6Vitamin B6)又稱吡哆素,其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺,在體內(nèi)以磷酸酯的形式存在,是一種,在細(xì)胞中參與多種蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝,對(duì)生物體具有極其重要的作用。

測(cè)定原理

VB64-氨基在強(qiáng)氧化劑作用下生成穩(wěn)定的黃色化合物,在390nm有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、研缽、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

維生素B6測(cè)試盒可見分光光度法

50管/48樣

可見分光光度法

BK-01S6993

11.png 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

5g 二硫蘇糖醇 (DTT) Dithiothreitol(DTT) 常溫保存

50T 大腸埃希菌(大腸O157)stx1(282bp)和stx2(584bp)常規(guī)PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

30次 一站式蛋白質(zhì)非變性PAGE套裝(中pH 緩沖液套) One-Stop Protein Native PAGE Pack 常溫保存(上樣液需要-20℃保存)

50T 玉米CBH-351 PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

15次 動(dòng)物線粒體純化試劑盒 Animal  Mitochondria Purification Kit 常溫保存

100mL HEPPS Buffer,0.2M,pH7.0  HEPPS Buffer,0.2M,pH7.0  常溫保存

150次 DNA 修復(fù)混合液  DNA Repair Mix -20℃保存

2 ug pAdTrack-CMV pAdTrack-CMV 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

其它菌檢測(cè)  

1瓶 Neuro-2a [N2a;Neuro 2a]細(xì)胞株 Neuro-2a [N2a;Neuro 2a] 低溫運(yùn)輸和保存

大腸菌群(日本) Coliform Medium(Japan) 250g

維生素B6測(cè)試盒可見分光光度法Desmocollin 4  橋粒糖蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-Rictor (Thr1135)  磷酸化雷帕霉素靶蛋白復(fù)合體2抗體 規(guī)格: 0.1ml

MASP2  甘露聚糖結(jié)合凝集素絲肽2抗體 規(guī)格: 0.1ml

PDZD9  PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK9蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Plasminogen  纖維蛋白溶原抗體 規(guī)格: 0.1ml

HIFPH4  缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰4羥化抗體 規(guī)格: 0.2ml

CaMK2 beta/CaMK2 gamma  鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激2b/2γ抗體 規(guī)格: 0.1ml

C15orf52  15號(hào)染色體開放閱讀框52抗體 規(guī)格: 0.2ml

Histone H3 (Di Methyl K4)  二甲基化組蛋白H3K4抗體 規(guī)格: 0.1ml

HNF1/TCF1/HNF1A  肝細(xì)胞核因子1α抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-RAD51(Thr310)  磷酸化Rad51抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Bovine IgM/Bio  標(biāo)記的兔抗牛IgM 規(guī)格: 0.1ml

IFABP  小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-PIK3R1(Tyr556)  磷酸化磷脂酰肌醇激抗體 規(guī)格: 0.1ml

 


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