目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>土壤系列>> 漆酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
| 參考價(jià) | 面議 |
| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2023-12-24 18:28:28瀏覽次數(shù)：770評(píng)價(jià)
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是環(huán)保在線上看到的信息，謝謝!
| 貨號(hào) | BK-01S6938 |
|---|
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：漆酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
檢測(cè)方法：可見(jiàn)分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6938
產(chǎn)品分類：其它系列
商品介紹：
測(cè)定意義: 漆酶（Laccase）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍(lán)氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，具有較強(qiáng)的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測(cè)方面有非常廣泛的應(yīng)用。 測(cè)定原理 漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基，在420nm處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS，測(cè)定ABTS自由基的增加速率，可計(jì)算得漆酶活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。 |
所需的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
1 管 BL21(DE3)plysS大腸桿菌 BL21(DE3)plysS E.coli Strain -80℃保存
2 ug pBaBe-puro pBaBe-puro 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
HBI創(chuàng)傷弧菌生化鑒定條(GB) 5條/盒
250ML MABT Washing Solution,5X MABT Washing Solution,5X 常溫保存
DG-18瓊脂 DG-18 Agar 250g
10g L-(+) 乳酸鋰鹽 Lithium L-Lactate 室溫干燥保存
50T 貓PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
5mL 少突膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
100mL BES Buffer,0.5M,pH7.4 BES Buffer,0.5M,pH7.4 常溫保存
10mL 微量核酸沉淀劑 NA Precipitation Solution 室溫保存
2 ug pGEX-2TK2-Linker pGEX-2TK2-Linker 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
漆酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法Phospho-NDRG1 (Thr346) 磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體 規(guī)格: 0.1mlZO-1 胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗體（閉鎖小帶蛋白1） 規(guī)格: 0.1ml
COBLL1 Cordon bleu蛋白樣1抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-MEK1/2(Ser218/222) 磷酸化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體 規(guī)格: 0.1ml
MMP-11 基質(zhì)金屬蛋白-11抗體 規(guī)格: 0.1mlCNTNAP3 接觸蛋白相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml
GPD2 線粒體甘油三磷酸脫2抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-PKR (Thr446/451) 磷酸化蛋白激R抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-LKB1(Ser428) 磷酸化絲/蘇蛋白激抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-HSL (Ser660) 磷酸化荷爾蒙敏脂肪抗體 規(guī)格: 0.1ml
CXorf36 脫羧蛋白體36抗體 規(guī)格: 0.2mlDRD1 多巴胺受體D1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-human sIgA/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-human IgM/FITC FITC標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.3ml
GPRIN2 G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlGDNF Receptor alpha 2 膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α2抗體 規(guī)格: 0.1ml
PEPT1 腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1mlLASS1 壽相關(guān)基因lASS1抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-CPLA2(Ser505) 磷酸化胞漿型磷脂A2抗體 規(guī)格: 0.1mlTYRO3/MER+SKY 受體酪激抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格: 0.1mlmucin3/Muc3 粘蛋白-3抗體 規(guī)格: 0.2ml
KCNG2 心臟鉀離子通道蛋白亞基2抗體 規(guī)格: 0.2mlGLP-1 (7-36) 素樣肽-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是（1）試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒(méi)有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min）。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè)，通?？梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
會(huì)員.png)
5
環(huán)保在線