目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>土壤系列>> 土壤植酸酶測試盒可見分光光度法
| 貨號 | BK-01S6922 |
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實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：土壤植酸酶測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
檢測方法：可見分光光度法
產(chǎn)品貨號：BK-01S6922
產(chǎn)品分類：土壤系列
商品介紹：
測定意義: 植酸酶（phytase）是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸（鹽）的一類酶的總稱，屬磷酸單酯水解酶，它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷，降低糞便中的磷含量，減輕對環(huán)境的污染，改善營養(yǎng)成分的吸收和利用，因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。 測定原理 植酸酶在一定溫度和pH值條件下，水解底物植酸鈉生成無機(jī)磷與肌醇衍生物，無機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物，在700nm處有特征吸收峰，根據(jù)700nm處吸光值變化可計(jì)算得植酸酶活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋，甲苯（不允許快遞）。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
50T 羊偽結(jié)核棒狀桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
200 mL 人白細(xì)胞分離液1.078 Cell Separation Solution -20℃保存
25mL Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (reducing,4X) Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (reducing,4X) 常溫保存
1 mg Quin-2 AM Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
2 ug pLentiCRISPR cas9 v.2 pLentiCRISPR cas9 v.2 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
HC瓊脂基礎(chǔ) HC Agar Base 250g
1瓶 MNNG/HOSCl#5 [R-1059-D]細(xì)胞株 MNNG/HOSCl#5 [R-1059-D] 低溫運(yùn)輸和保存
A1 A1 Medium 250g
500mg 人血清白蛋白 V Albumin Human Serum, FractionⅤ 4℃保存
100mL Transformation Buffer-1 Transformation Buffer-1 常溫保存
100µL 小鼠抗SUMO標(biāo)簽蛋白單抗 Anti SUMO-Tag Mouse MAb -20℃保存
土壤植酸酶測試盒可見分光光度法Phospho-NFKB p65(Ser276) 磷酸化細(xì)胞核因子NF-κB p65抗體 規(guī)格: 0.1ml
TNF-alpha(1F6) 瘤壞死因子-α單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml
ATP citrate lyase/ACLY 三磷酸檸檬酸裂解抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-NPM (Thr199) 磷酸化核仁磷酸蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-eIF4EBP1/2/3(Thr36) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1,2,3抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-Rb(Ser249) 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-FoxO3a (Ser318/321) 磷酸化叉蛋白3A抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-HSL (Ser863) 磷酸化荷爾蒙敏脂肪抗體 規(guī)格: 0.1ml
RASL/RASL10A Ras樣蛋白家族10A抗體 規(guī)格: 0.2mlAdenylosuccinate Lyase 苷酸琥珀酸裂解抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 規(guī)格: 0.1mlCDK7 周期素依賴性激7抗體 規(guī)格: 0.1ml
SFRP1 分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1mlC11orf74 11號染色體開放閱讀框74抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-C-Myc(Thr373) 磷酸化致基因C-Myc抗體 規(guī)格: 0.2mlIRF4 干擾素調(diào)節(jié)因子4抗體 規(guī)格: 0.2ml
PRAME 黑色素瘤優(yōu)先表達(dá)抗原抗體 規(guī)格: 0.2mlLRRN5 富含亮重復(fù)神經(jīng)元5抗體 規(guī)格: 0.2ml
HSP105 熱休克蛋白105抗體 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-Bov IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
Defensin β2/DEFB2/HBD-2 防御素β2抗體 規(guī)格: 0.1mlC1orf93 1號染色體開放閱讀框93抗體 規(guī)格: 0.2ml
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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