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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>土壤系列>> 土壤錳過氧化物酶(SMnp)測試盒微量法

土壤錳過氧化物酶(SMnp)測試盒微量法
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更新時(shí)間:2023-12-24 21:55:40瀏覽次數(shù):534評價(jià)

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貨號 BK-01S6866
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注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:土壤錳過氧化物酶(SMnp)測試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣

檢測方法:微量法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6866

產(chǎn)品分類:土壤系列
商品介紹:

測定意義:

錳過氧化物酶(EC1.11.1.13)是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶,主要存在于擔(dān)子菌中,屬于木質(zhì)素降解酶系,能有效的降解木質(zhì)素及廢水和土壤中比較難降解的氯化物,疊氮化合物、DTT,多環(huán)芳烴等。

測定原理

錳過氧化物酶在Mn2+存在的條件下,將愈創(chuàng)木酚氧化為四鄰甲氧基連酚,在465nm有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀、甲苯。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

100g 氯化 Choline Chloride 室溫干燥保存

50T 巴西果仁PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

10mL 亞氨二乙酸介質(zhì) IDA(Iminodiacetic Acid)Resin 常溫保存

2 ug pYr-AdShuttle- 1 pYr-AdShuttle- 1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

50次 酵母DNAout  

2 ug pESC-URA pESC-URA 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

吖啶黃素 acriflavine 3.75mg/支*5

10g  B1 Vitamin B1 室溫保存

250次 柱式動(dòng)物RNAout Column Animal RNAOUT 4℃保存

24 T 鈣調(diào)神經(jīng)測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

50mL Magnesium Chloride Solution(氯化鎂溶液),1M  Magnesium Chloride Solution,1M  常溫保存

土壤錳過氧化物酶(SMnp)測試盒微量法FAM46D/CT112  瘤/睪抗原112抗體 規(guī)格: 0.2mlGPS1/CSN1  G蛋白通路抑制蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

SDCG1  清學(xué)定義結(jié)腸抗原1抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-FGFR1 (Tyr766)  磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生因子受體1抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-Filamin A/FLNA (Tyr1046)  磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體 規(guī)格: 0.1ml

AGPA/Alpha 1 Acid Glycoprotein  α1酸性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

MTMR8  肌管素相關(guān)蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml

PMS1  瘤錯(cuò)配修復(fù)基因PMS1抗體 規(guī)格: 0.2ml

CDK1/Cdc2  周期素依賴性激1抗體 規(guī)格: 0.1ml

X protein/HB-X (N-Terminus)  抗乙肝毒X蛋白抗體(N端) 規(guī)格: 0.2ml

ANKS3  錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

KLHL9  kelch樣蛋白9抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-RAD9(Ser387)  磷酸化細(xì)胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit anti-mouse IgM whole serum  兔抗小鼠IgM抗清 規(guī)格: 1ml 

 


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