目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>土壤系列>> 土壤羥胺還原酶(HR)測試盒可見分光光度法
貨號 | BK-01S6871 |
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實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
土壤羥胺還原酶(HR)測試盒可見分光光度法 | 50管/24樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6871 |
商品介紹:
測定意義: 土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨,土壤中的還原態(tài)化合物可作為氫的供體,其強弱影響到土壤氮代謝過程中氮素的氨揮發(fā)損失,間接影響氮肥的利用效率。 測定原理 硫酸鐵銨中的Fe3+可將羥胺氧化為氮氣,自身被還原為Fe2+,Fe2+在弱酸條件下與鄰菲羅琳形成橙紅色配合物,在510nm處有吸收峰,羥胺還原酶作用于羥胺,使配合物形成量減少,510nm處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。 自備實驗用品及儀器 天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、震蕩儀、氮吹儀。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
5g 蘇丹Ⅲ Sudan Ⅲ 室溫保存
50T 玉米MON810 PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
15次 植物線粒體純化試劑盒 Plant Mitochondria Purification Kit 常溫保存
100mL HEPPS Buffer,0.2M,pH8.5 HEPPS Buffer,0.2M,pH8.5 常溫保存
0.5mL 探針標記專用PCR Mix
2 ug pLOX-TERT-iresTK pLOX-TERT-iresTK 低溫運輸,-20℃保存
根瘤菌 250g
1瓶 NCI-H157細胞株 NCI-H157 低溫運輸和保存
SOC SOC Medium 250g
2mg Aprotinin 4℃保存
1000mL Tris Buffered Saline(TBS),20X Tris Buffered Saline(TBS),20X 常溫保存
土壤羥胺還原酶(HR)測試盒可見分光光度法LSP1 白細胞F肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
PAR4 蛋白激活受體4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-Bov IgG/RBITC 羅丹明標記的小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 0.1mlKLHL26 Kelch樣蛋白26抗體 規(guī)格: 0.2ml
TFR2/Transferrin Receptor 2 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2抗體 規(guī)格: 0.2mlHOXB5 同源盒蛋白HOXB5抗體 規(guī)格: 0.1ml
SOX9/SRA1 轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlTULP2/CT65/Cancer testis antigen 65 瘤/睪抗原65 規(guī)格: 0.2ml
ERK4 細胞外信號調(diào)節(jié)激4抗體 規(guī)格: 0.1mlAngiotensin II type 1A receptor 管緊張素Ⅱ1A型受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
CCL16/HCC-4 巨噬細胞性蛋白16抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgG/FITC FITC標記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.3ml
KCTD5 鉀離子通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2mlStanniocalcin 1 斯鈣素抗體 規(guī)格: 0.1ml
PI3K/PI3 kinase p85 alpha subunit 磷脂酰肌醇激抗體 規(guī)格: 0.1mlTRIM7/RNF90 糖原生成素相互作用蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
HBV pre S1/S2 protein 人乙肝毒pre S1/S2蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlDUSP13 雙特異性磷酸13抗體 規(guī)格: 0.2ml
MST4 絲/蘇蛋白激MST4抗體 規(guī)格: 0.2mlBMP2 骨形態(tài)發(fā)生蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
PASK/STK39 絲/蘇蛋白激39抗體 0.2mlYB1 y-盒結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml