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目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>土壤系列>> 土壤漆酶測試盒可見分光光度法

土壤漆酶測試盒可見分光光度法
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參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
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更新時間:2023-12-25 07:51:13瀏覽次數(shù):367評價

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貨號 BK-01S6875
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商品介紹:

測定意義:

漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環(huán)境污染物降解和木質纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應用。

測定原理

漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數(shù)遠大于底物ABTS,測定ABTS自由基的增加速率,可計算得漆酶活性。

自備實驗用品及儀器

天平、常溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、震蕩儀。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

土壤漆酶測試盒可見分光光度法

50管/24樣

可見分光光度法

BK-01S6875

11.png 

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

250mL RNase-Free Tris-HCl Solution(無RNase的Tris-HCl溶液),1M,pH8.0   RNase-Free Tris-HCl Solution,1M,pH8.0   常溫保存

100mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 6.5  常溫

2 ug pDC311 pDC311 低溫運輸,-20℃保存

皰肉基礎 Cooked Meat Medium Base 250g

1g 魚藤酮 Rotenone 室溫避光保存

50T 兔黏液瘤病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

2 g Sodium orthovanadate (酯抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL Glucose Solution(葡萄糖溶液),20%(W/V) Glucose Solution,20%(W/V) 常溫保存

1個 暗盒(5×7英寸) Cassette 室溫

500mL Blotto-Tween in TBS   Blotto-Tween in TBS   常溫保存

季銨鹽類中和劑管(帶棉簽)  10ml*20

土壤漆酶測試盒可見分光光度法USP9X  泛素特異性蛋白9X抗體 規(guī)格: 0.2ml

AUP1/Ancient ubiquitous protein 1  原始廣泛存在蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Insulin Receptor/CD220  胰島素受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

Elastin  彈性蛋白α抗體 規(guī)格: 0.1ml

SEZ6L  癲癇樣相關蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml

Destrin 19/ADF  肌動蛋白解聚因子19抗體 規(guī)格: 0.1ml

ECE2  內皮素轉化2抗體 規(guī)格: 0.1ml

ADCK4  ADCK4蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

MLN/Motilin  胃動素抗體 規(guī)格: 0.1ml

GSK-3 Beta (CT)  葡萄糖合成激-3β抗體 規(guī)格: 0.1ml

Collagen I  Ⅰ型膠原抗體 規(guī)格: 0.1ml

C17orf64  17號染色體開放閱讀框64抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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