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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>土壤系列>> 土壤過氧化氫酶(SCAT)測試盒微量法

土壤過氧化氫酶(SCAT)測試盒微量法
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參考價(jià) 面議
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更新時(shí)間:2023-12-25 08:41:15瀏覽次數(shù):430評價(jià)

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貨號 BK-01S6830
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注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:土壤過氧化氫酶(SCAT)測試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣

檢測方法:微量法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6830

產(chǎn)品分類:土壤系列
商品介紹:

測定意義:

S-CAT是土壤微生物代謝的重要酶類,在H2O2清除系統(tǒng)中具有重要作用。

測定原理:

H2O2240nm下有特征吸收峰,通過測定與土壤反應(yīng)后溶液在此波長下吸光度的變化,即可反應(yīng)S-CAT活性的高低。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

2 ug pSUPER-puro pSUPER-puro 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100g RNSDS (十二烷基)   常溫

2 ug pCold-SUMO pCold-SUMO 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

NGKG寒天基礎(chǔ)培地 NGKG Medium 250g

25g QAE 葡聚糖凝膠 A-25 QAE-Sephadex A-25 室溫保存

50T 雙??虏《綪CR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

1 mg Phorbol 12-myristate 13-acetate(PKC激活劑)  Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

500mL Gelatin Blocking Buffer in PBS   Gelatin Blocking Buffer in PBS   常溫保存

1瓶 Caki-1細(xì)胞株 Caki-1 低溫運(yùn)輸和保存

100mL RNase-Free Sodium Acetate Solution(無RNase的乙酸鈉溶液),3M,pH5.2  RNase-Free Sodium Acetate Solution,3M,pH5.2  常溫保存

1 管 Stbl3大腸桿菌 Stbl3 E.coli Strain -80℃保存

土壤過氧化氫酶(SCAT)測試盒微量法LAIR-2/CD306  白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體2抗體 規(guī)格: 0.1mlDonkey Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

Calpain 12  鈣激活蛋白12抗體 規(guī)格: 0.2mlC9orf72  9號染色體開放閱讀框72抗體 規(guī)格: 0.2ml

JMJD5  組蛋白去甲基化JMJD5抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-Guinea pig IgM/APC  APC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

MRP9/ABCC12  多藥耐藥相關(guān)蛋白9抗體 規(guī)格: 0.2mlProtein G  重組蛋白G抗體 規(guī)格: 0.1ml

GPX4  過氧化4抗體 規(guī)格: 0.2mlFMN2  形成素2抗體(成蛋白) 規(guī)格: 0.2ml

GIDRP88  生抑制和分化相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlNAPSIN A/ASP4  天冬蛋白ASP4抗體 0.2ml

Cyclin E  周期素E抗體 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-rabbit IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

PEPT2/SLC15A2  腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlTSEN2  tRNA剪接內(nèi)切2抗體 規(guī)格: 0.2ml

DHRS2  脫/還原家族成員2抗體 規(guī)格: 0.2mlTMEM173  跨膜蛋白173抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-PIK3C3(Ser676)  磷酸化磷脂酰肌醇激3催化亞單位3抗體 規(guī)格: 0.1mlUPP1/Uridine Phosphorylase 1  核苷磷酸化1抗體 規(guī)格: 0.2ml

RanBP7/Importin 7  RAN結(jié)合蛋白7抗體 規(guī)格: 0.2mlCREB-1  環(huán)苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Tal1  T細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞性白1蛋白/蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2mlGANAB/alpha Glucosidase II  α葡萄糖苷2抗體 規(guī)格: 0.1ml 

 


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