目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>糖代謝系列>> β木糖苷酶測試盒可見分光光度法
貨號 | BK-01S6760 |
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注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:β木糖苷酶測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
檢測方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6760
產(chǎn)品分類:糖代謝系列
商品介紹:
測定意義: β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細菌和真菌等生物體,是催化木聚糖類半纖維素降解的關(guān)鍵酶,產(chǎn)物木糖可作為碳源應(yīng)用于微生物發(fā)酵。另外,β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應(yīng)用于造紙工業(yè),比傳統(tǒng)的漂白法環(huán)保,具有廣泛的應(yīng)用價值。 測定原理 β-木糖苷酶催化對硝基-β-D-木糖苷產(chǎn)生對硝基,對硝基在405nm處有特征吸收峰,測定405nm光吸收增加速率,可計算β-木糖苷酶活性。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacC) Maconkey Agar Medium 250g
1瓶 CFPAC-1細胞株 CFPAC-1 低溫運輸和保存
巧克力瓊脂平板(9cm) Chocolate Agar 10個/包
1000U T3 RNA聚合 T3 RNA Polymerase -20℃保存
500mL Phosphate Buffered Saline,10X,without potassium Phosphate Buffered Saline,10X,without potassium 常溫保存
250g 干粉型SOB培養(yǎng)基 SOB Medium Powder 常溫
2 ug pQE-60 pQE-60 低溫運輸,-20℃保存
實驗生化管 KCN Biochemical control 20支
2 ug pBlueScriptR PPP2R5 B pBlueScriptR PPP2R5 B 低溫運輸,-20℃保存
脫氧膽鹽檸檬酸鹽瓊脂培養(yǎng)基 Deoxycholate Citrate Agar Medium 250g
100mL 甘油 Glycerol 室溫保存
β木糖苷酶測試盒可見分光光度法PRKAA2/AMPK alpha 2 苷單磷酸活化蛋白激α2抗體 規(guī)格: 0.1mlCoronin 3 冠蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml
TMPRSS4 膜型絲蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-dog IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.1ml
C1ORF74 1號染色體開放閱讀框74抗體 規(guī)格: 0.2mlBeta-arrestin 1 β-抑制蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
ATXN7L2 共濟失調(diào)蛋白7樣2抗體 規(guī)格: 0.2mlRET/C ret 指狀蛋白RET抗體 規(guī)格: 0.2ml
IL-10RA 白細胞介素-10受體a抗體 規(guī)格: 0.2mlLPP/LIM protein 脂肪瘤相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
Nociceptin receptor 孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體 規(guī)格: 0.2ml
FAM154A FAM154A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rffl/RING finger protein 189 環(huán)指蛋白189抗體 規(guī)格: 0.2ml
AIM2 干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Cphospho-C CBL(Tyr700) 磷酸化原基因CBL2抗體 規(guī)格: 0.1ml
FBXO21 F-box蛋白21抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-PRL(Ser163) 磷酸化泌素抗體 規(guī)格: 0.1ml
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)