目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>糖代謝系列>> 半纖維素含量測試盒微量法
貨號 | BK-01S6773 |
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本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
半纖維素含量測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6773 |
商品介紹:
測定意義: 半纖維素是植物細(xì)胞壁中與纖維素緊密結(jié)合的多糖混合物,是構(gòu)成細(xì)胞初生壁的主要成分,廣泛存在于植物中,是一種新型可利用能源。 測定原理 半纖維素經(jīng)酸處理后轉(zhuǎn)化成還原糖,與DNS生成紅棕色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰,吸光值大反映了半纖維素含量。 需自備的儀器和用品、 天平、40目篩,恒溫水浴鍋、烘箱、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
2 ug pENTR1A pENTR1A 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
BCYE瓊脂平板 BCYE Agar Base 10個(gè)/包
5g Uracil 室溫保存
50T 豬圓環(huán)病毒Ⅰ型PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
25 T 超微量ATP測試盒(可測總ATPase) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
125mL Luminol and Oxidizing Solutions Luminol and Oxidizing Solutions 常溫保存
100mL 核酸稀釋液,測OD專用 Diluent for NA OD Detection 常溫
2 ug pLVX-AmCyan1-N1 pLVX-AmCyan1-N1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
5次 TMB法辛雜交試劑盒
1瓶 P3-X63-Ag8.653細(xì)胞株 P3-X63-Ag8.653 低溫運(yùn)輸和保存
腦心浸液肉湯 Brain Heart Infusion Broth 250g
半纖維素含量測試盒微量法NR1/NMDAR1 谷受體1抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-Tau protein(Ser396) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
HMGCL 三羥基三甲基輔A裂解抗體 規(guī)格: 0.2mlIL-9 白介素9抗體 規(guī)格: 0.1ml
BMP9 骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體 規(guī)格: 0.2mlTomoregulin-1 腦瘤抑蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗猴IgG 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Goat IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml
PYGL 肝糖原磷酸化抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-Src(Tyr529) 磷酸化Src原基因抗體 規(guī)格: 0.1ml
RNF14 環(huán)指蛋白14抗體 規(guī)格: 0.2mlNPC1/Niemann Pick C1 尼曼匹克C1前體蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
CTNNBL1/Beta catenin like 1 β連環(huán)蛋白樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlEphrin B Ephrin B抗體 規(guī)格: 0.1ml
LC3C 微管相關(guān)蛋白輕鏈3C抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-human IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
PDI/P4HB/ERBA2L/PDIA3 蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)抗體 規(guī)格: 0.1mlPCDHA2 原鈣粘附蛋白α2抗體 規(guī)格: 0.2ml
IL-1R1/CD121a/IL1 Receptor I 白介素1受體1抗體 規(guī)格: 0.1mlTyrosinase 酪抗體 規(guī)格: 0.1ml
YY1AP1/HCCA2 肝相關(guān)蛋白2抗體(轉(zhuǎn)錄因子YY1結(jié)合蛋白1抗體) 規(guī)格: 0.2mlGoat Anti-Chicken IgG/Bio 標(biāo)記的羊抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-human IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)