目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>蔗糖系列>> 中性轉(zhuǎn)化酶（NI）測試盒可見分光光度法
| 貨號 | BK-01S6712 |
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注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時間不夠，可以延長反應(yīng)時間（反應(yīng)時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：中性轉(zhuǎn)化酶（NI）測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
檢測方法：可見分光光度法
產(chǎn)品貨號：BK-01S6712
產(chǎn)品分類：蔗糖系列
商品介紹：
測定意義: 蔗糖轉(zhuǎn)化酶（Invertase，Ivr）催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 pH，將高等植物Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶（AI）和中性轉(zhuǎn)化酶（NI）兩種類型。 NI主要存在于細(xì)胞質(zhì)中，負(fù)責(zé)分解細(xì)胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖。 測定原理： NI催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖，進(jìn)一步與3,5－二硝基水楊酸反應(yīng)，生成棕紅色氨基化合物，在510nm有特征光吸收，在一定范圍內(nèi)510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計算NI活性 自備用品： 可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實驗方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
2 ug pNTAP-Mef2a pNTAP-Mef2a 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
硝酸鹽肉湯（還原） 20支
1瓶 U14-GFP細(xì)胞株 U14-GFP 低溫運(yùn)輸和保存
D/E中和瓊脂 D/E Ｎeutralizing Agar 250g
100mg D- 果糖 -6- 二鈉 D-Fructose -6-Phosphate -20℃保存
50T (OC43/HKU1)PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
30µL α-Actin小鼠單抗 α-Actin Mouse MAb -20℃保存
2 ug YFP-Membrane YFP-Membrane 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
2mL 氨基磁珠 Magnetic beads,Amino 4℃密閉、豎直保存
2 ug pEYFP pEYFP 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
50次 柱式植物油DNAout Column Plant Oil DNAOUT 4℃保存
中性轉(zhuǎn)化酶（NI）測試盒可見分光光度法NPTX2 神經(jīng)細(xì)胞穿透素2抗體 規(guī)格: 0.2mlS-100/S100A1 S100A1抗體 規(guī)格: 0.1ml
TRH 促甲狀素釋放激素抗體 規(guī)格: 0.1mlMcl1/BCL2L3 髓樣分化蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Dermokine beta Dermokine β蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlFER/TYK3 酪蛋白激3抗體 規(guī)格: 0.2ml
EGFRvIII 表皮生因子受體III型突變體抗體 規(guī)格: 0.1mlGLUT2 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
RASSF3 Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體 規(guī)格: 0.2mlZNF231/Bassoon 鋅指蛋白231抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-dog IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.1mlVAMP-1/Synaptobrevin-1 VAMP1囊泡相關(guān)膜蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
FAM156A/TMEM2 跨膜蛋白29抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgG 兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 1mg
PRSS10/TMPRSS2 絲蛋白10抗體 規(guī)格: 0.2mlPHKA1 磷酸激α1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Cytoglobin 細(xì)胞球蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlRALA+RALB Ras樣蛋白A+B抗體 規(guī)格: 0.2ml
GRK2/BARK1/ADRBK1 G蛋白偶合受體激2抗體 規(guī)格: 0.1mlE3 ubiquitin ligase/RNF218 E3泛素連接抗體 規(guī)格: 0.2ml
CLDND1 膜蛋白CLDND1抗體 規(guī)格: 0.1mlCYP11B2 醛固酮合成CYP11B2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Cytokeratin 5/CK5 細(xì)胞角蛋白5抗體 0.1mlFLAP/5-lipoxygenase activating protein 5脂氧合激活蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
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