目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>淀粉系列>> ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒紫外分光光度法
貨號 | BK-01S6684 |
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注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒紫外分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
檢測方法:紫外分光光度法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6684
產(chǎn)品分類:淀粉系列
商品介紹:
測定意義: AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中,催化葡萄糖-1-磷酸與ATP反應(yīng)生成淀粉合成的直接前體ADPG,是植物淀粉生物合成的主要限速步驟。 測定原理 AGP催化的逆向反應(yīng)生成G1P,在反應(yīng)體系中添加的磷酸己糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,340nm下測定NADPH增加速率,即可計算AGP活性。 需自備的的儀器和用品 紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
50次 柱式RNA純化試劑盒 Column RNAclean-Up 常溫保存,RNA洗脫液需要-20℃保存
1g 纖維素 Cellulase From Aspergillus Niger 4℃保存
250mL Yeast Lysis Solution for DNA Isolation Yeast Lysis Solution for DNA Isolation 常溫保存
1g n- 十二烷基-β-D- 麥芽糖苷 n-Dodecyl-β-D-Maltoside 常溫保存
2 ug pBBR1Tp pBBR1Tp 低溫運輸,-20℃保存
4次 大提柱式植物DNAout Maxi Column Plant DNAOUT 常溫
2 ug pENTR pENTR 低溫運輸,-20℃保存
雙歧桿菌培養(yǎng)基 Bifidobacterium Medium 250g
5mg 衣 Tunicamycin 4℃保存
50T 豬皰疹病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
24 T 肌酸激測試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒紫外分光光度法phospho-c-Raf(Ser471) 磷酸化原基因c-Raf抗體 規(guī)格: 0.1ml
CRMP4/DRP3 腦衰蛋白反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Histone H2A.x 組蛋白H2AX抗體 規(guī)格: 0.2ml
Integrin alpha 7/ITGA7 整合素α7抗體 規(guī)格: 0.1ml
EphA4 R/Eph receptor A4 酪蛋白激A4受體抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Mink IgG/AP 堿性磷酸(AP)標記的兔抗水貂IgG 規(guī)格: 0.1ml
FGF9 堿性成纖維細胞生因子9抗體 規(guī)格: 0.2ml
Cystatin A 胱抑素A/半胱蛋白抑制劑A抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Gold 膠體金標記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格: 0.5ml
Oxytocin R 催產(chǎn)素受體(宮素受體)抗體 規(guī)格: 0.1ml
His tag(2D5) 小鼠抗聚組單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml
RIPK-1/RIP 絲蘇激1受體相互作用蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml