目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>脂肪酸代謝系列>> 血清高密度脂蛋白(HDLC)測(cè)試盒微量法
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更新時(shí)間:2023-12-27 11:35:43瀏覽次數(shù):694評(píng)價(jià)
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貨號(hào) | BK-01S6665 |
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實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
血清高密度脂蛋白(HDLC)測(cè)試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6665 |
商品介紹:
測(cè)定意義: 高密度脂蛋白為血清蛋白之一,主要由肝臟合成,運(yùn)載周?chē)M織中的,再轉(zhuǎn)化為膽汁酸或直接通過(guò)膽汁從腸道排出,是一種抗動(dòng)脈粥樣硬化的血漿脂蛋白,是冠心病的保護(hù)因子,俗稱“血管清道夫",對(duì)冠心病的臨床診斷是一個(gè)重要的參考指標(biāo)。 測(cè)定原理 用沉淀劑分離血清中的高密度脂蛋白,利用酯酶催化酯水解生成游離和游離脂肪酸,從而把酯轉(zhuǎn)化為FC;進(jìn)一步利用氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過(guò)氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品 離心機(jī),恒溫水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
10mg 5′ - 二鳥(niǎo) Guanosine 5′-Diphosphate (GDP),Disodium Salt -20℃保存
50T 芥末PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
250mL Carnoy固定液 Carnoy Solution 室溫避光保存
2 ug pBlueScriptR BBS4 pBlueScriptR BBS4 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
100g DNGuSCN(異硫酸胍)
2 ug pFUGW-H1 pFUGW-H1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
碘液 2ml*20支
2 ug pTf16 pTf16 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
MUGal肉湯 MUGal Broth 100g
100U Poly(A)聚合,E.coli Poly(A) Polymerase -20℃保存
250mL Phosphate Buffered RIPA Phosphate Buffered RIPA 常溫保存
血清高密度脂蛋白(HDLC)測(cè)試盒微量法IL-2 白介素2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Connexin 43 間隙連接蛋白43抗體 規(guī)格: 0.1ml
UBE2C 泛素蛋白連接C抗體 規(guī)格: 0.2ml
CCZ1 CCZ1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
RECQL5 RecQ解旋樣蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Caspase-9 (Thr125) 磷酸化半胱蛋白9抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-YB1(Ser102) 磷酸化DNA結(jié)合蛋白B抗體 規(guī)格: 0.1mlAIM1L 黑色素瘤缺失樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
C19orf24 19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體 規(guī)格: 0.2mlPGGT1B/FNTB 蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移1β(FTβ)抗體 規(guī)格: 0.2ml
PRL3/PRL-R 磷酸酯3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlCD36L1/SRB1/HDL-R 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
ChRM3/Acetylcholine receptor(M3) 毒蕈堿型乙酰受體M3抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho C-Myc(Thr58/pSer62) 磷酸化致基因C-Myc抗體 規(guī)格: 0.1ml
ADAM12/MLTN 去整合素樣金屬蛋白12抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-chicken IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗雞IgM 規(guī)格: 0.1ml
BGP/Osteocalcin 骨保護(hù)蛋白/骨鈣素抗體 規(guī)格: 0.1mlARC/Arg3.1 ARC抗體 規(guī)格: 0.1ml
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)