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目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>氨基酸代謝系列>> 氨基酸(AA)含量測試盒微量法

氨基酸(AA)含量測試盒微量法
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更新時間:2023-12-27 19:29:21瀏覽次數(shù):624評價

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貨號 BK-01S6530
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注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:氨基酸(AA)含量測試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣

檢測方法:微量法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6530

產(chǎn)品分類:氨基酸代謝系列
商品介紹:

測定意義:

動物肝臟、腎臟是氨基酸代謝的主要器官,故尿中氨基酸的變化最能反應肝、腎的生理狀態(tài)。另外,氨基酸還能反應灼傷、傷寒等方面情況。植物體內(nèi)氨基酸含量對研究植物在不同條件下及不同生長發(fā)育時期氮代謝變化、植物對氮素的吸收、運輸、同化及營養(yǎng)狀況等有重要意義。

測定原理:

氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應,產(chǎn)生藍紫色化合物,在570 nm有特征吸收峰;通過測定570 nm吸光度,來計算氨基酸含量。

自備儀器及用品:

臺式離心機、水浴鍋、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、無水乙醇、冰和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

消毒液中和肉湯 Disinfectant Neutralization Broth 250g

100mg 5- 溴 -4- 氯 -3- 基鹽 (BCIP) BCIP -20℃保存

250mL Veronal Buffered Saline with Mg++ and Ca++ (VBS++)  Veronal Buffered Saline with Mg++ and Ca++ (VBS++)  常溫保存

200mL Bradford法蛋白定量試劑盒 Staining Kit for His-Tag -20℃保存

2 ug pTRE-Tight-Luc pTRE-Tight-Luc 低溫運輸,-20℃保存

100次 磁珠血液DNAout MAG Blood DNAOUT 磁珠4℃保存,蛋白K溶液-20℃保存(勿反復凍融)

 

2 ug pSilencer 4.1-CMV neo pSilencer 4.1-CMV neo 低溫運輸,-20℃保存

CIN培養(yǎng)基 Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar 250g

5g 蘇丹黑 B Sudan Black B  室溫保存

50T 玉米MON810/MS PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

15次 植物葉綠體純化試劑盒 Plant Chloroplast Purification Kit 4℃保存

氨基酸(AA)含量測試盒微量法EML4/C2orf180  限制過度增相關蛋白EML4抗體 規(guī)格: 0.2ml

TSLP (human)  胸基質(zhì)淋巴細胞生成素-1抗體(人) 規(guī)格: 0.2ml

CBFb/PEBP2B  多瘤毒增強了結合蛋白2β抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-CD19(Ser227)  磷酸化CD19抗體 0.1ml

LAMP-1/CD107a/LAMPA  溶體相關膜蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Geminin  DNA復制抑制因子抗體 規(guī)格: 0.2ml

RAR α  維甲酸受體-α 抗體 規(guī)格: 0.1ml

Cystatin D  胱抑素D/半胱蛋白抑制劑D抗體 規(guī)格: 0.2ml

DHRS9  短鏈脫/還原家族9抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-TNIK(Ser764)  磷酸化TRAF2和NCK激相互作用蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

AP2 gamma  轉錄因子AP-2γ抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-EIF4B (Ser540)  磷酸化真核翻譯起始因子4B抗體 規(guī)格: 0.1ml 

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