目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 50μl類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT）測試盒微量法
| 貨號 | BK-01S6470 |
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實驗方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT）測試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
檢測方法：微量法
產(chǎn)品貨號：BK-01S6470
產(chǎn)品分類：氧化與抗氧化系列
商品介紹：
測定意義: 花色苷是一類易溶于極性溶劑的天然色素，屬黃酮類化合物。花色苷廣泛存在于植物的根、莖、葉、花和果實中，使其呈現(xiàn)由紅到紫等不同顏色，是植物主要的呈色物質(zhì)。 類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶（UDP-glycose flavonoid glycosyltransferase, UFGT）是花色苷合成過程的最后一個酶，可以把不穩(wěn)定的花色素催化成花色苷，在一定范圍內(nèi)，UFGT活性與花色素苷的合成呈現(xiàn)正相關(guān)。 測定原理： UFGT催化UDPG與槲皮素生成UDP；UDP在丙酮酸激酶與乳酸脫氫酶作用下，氧化NADH為NAD+，NAD+生成速度與UDP含量成正比，通過340nm吸光度下降速度反映UFGT活性。 需自備的儀器和用品： 酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔酶標板、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本： 先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時間不夠，可以延長反應(yīng)時間（反應(yīng)時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
10次 百萬堿基級血液DNAout
2 ug pEF1/myc-His C pEF1/myc-His C 低溫運輸，-20℃保存
改良番茄汁培養(yǎng)基 Tomato Juice Agar,Modified 250g
5g β- 硫代酸 TBA(2-Thiobarbituric Acid) 密封干燥保存
50T 粘附性大腸桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
5mL CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑盒 Cell Counting Kit-8 4℃避光保存一年有效，-20℃避光保存兩年有效
500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH3.5 Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH3.5 常溫保存
10次 DNA Shuffing試劑盒 DNA Shuffling Kit -20℃保存
2 ug pLV-EBFP2-nuc pLV-EBFP2-nuc 低溫運輸，-20℃保存
10%NaCl卵黃乳液 5ml*10支
1瓶 NCI-H209細胞株 NCI-H209 低溫運輸和保存
類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT）測試盒微量法Insulin 抗抗體 規(guī)格: 0.1ml
ITGB4 整合素β4抗體 規(guī)格: 0.1ml
Caspase 2 半胱胺酸蛋白-2抗體 規(guī)格: 0.1ml
HIDE1/C19orfC38 19號染色體開放閱讀框38抗體 規(guī)格: 0.2ml
NFATc1/NFAT2 活化T細胞核因子1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
SRRM3 絲/相關(guān)核基質(zhì)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml
MTHFR 亞甲基還原MTHFR抗體 規(guī)格: 0.1ml
Donkey Anti-rabbit IgG/AP 堿性磷酸（AP）標記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml
KSR1 Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-cdc25C (Ser216) 磷酸化細胞分裂周期蛋白25C抗體 規(guī)格: 0.1ml
Cecropin 抗菌肽/天蠶素抗體 規(guī)格: 0.2ml
MEK6 絲裂原活化蛋白激MKK6抗體 規(guī)格: 0.1ml
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