目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 尿酸(UA)含量測試盒可見分光光度法
| 貨號 | BK-01S6450 |
|---|
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：尿酸(UA)含量測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
檢測方法：可見分光光度法
產(chǎn)品貨號：BK-01S6450
產(chǎn)品分類：氧化與抗氧化系列
商品介紹：
測定意義: UA是鳥類和爬行類動物的主要代謝產(chǎn)物，正常人體尿液中產(chǎn)物主要為尿素，含少量尿酸。此外，UA還是重要的抗氧化劑，能清除超氧化物，羥自由基等。體內(nèi)UA生成量和排泄量不平衡會導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生。例如，血中UA升高會引起痛風(fēng)、腎功能損害和動脈硬化，相反UA降低會引起惡性貧血，在臨床診斷上具有重要的意義。 測定原理： 尿酸酶能催化UA生成，CO2及H2O2，H2O2 氧化亞鐵中的Fe2+ 生成Fe3+ ，Fe3+進一步與酚和4-氨基縮合生成紅色醌類化合物，在505nm下有特征吸收峰，測定反應(yīng)體系505nm的吸收值，可計算尿酸的含量。 需自備的儀器和用品： 恒溫水浴鍋、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本： 先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實驗方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
100mL AMP Buffer，0.5M，pH10.5 AMP Buffer，0.5M，pH10.5 常溫保存
50uL 電泳級耐熱型SYBR染料 SuperSYBR，EG 常溫閉光
2 ug pGEMEX-1 pGEMEX-1 低溫運輸，-20℃保存
抗生素檢定培養(yǎng)基9號 Antibiotic Agar NO.9 250g
1瓶 DLD-1細胞株 DLD-1 低溫運輸和保存
BCYE-CYS瓊脂平板（9cm） BCYE-CYS Agar 10個/包
1000U T4 RNA連接（T4 RNA Ligase) T4 RNA Ligase -20℃保存
乳酸桿菌選擇性瓊脂 Lactobacillus Selective Agar 250g
1 管 JM103大腸桿菌 JM103 E.coli Strain -80℃保存
2 ug pPinPoint-Xa3 pPinPoint-Xa3 低溫運輸，-20℃保存
乳糖發(fā)酵管 20支
尿酸(UA)含量測試盒可見分光光度法FOG1 GATA結(jié)合蛋白1伴侶蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
PCNA(1C11) 小鼠增細胞核抗原單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-chicken IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml
VNN1 管非癥分子1抗體 規(guī)格: 0.2mlCCL21/6Ckine 淋巴細胞趨化因子CCL21抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-MCK10/CD167a/DDR1(Tyr513) 磷酸化神經(jīng)上皮酪激抗體（激10） 規(guī)格: 0.1mlGoat Anti-Bovine IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的羊抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
phospho-FADD(Ser194) 磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-human IgM/AP 堿性磷酸（AP）標記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml
URG4 (C terminal) 上調(diào)基因4抗體（C端） 規(guī)格: 0.2mlPhospho-Rb (Ser608) 磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Renin 素/管緊張素形成Ren1抗體 規(guī)格: 0.1mlITPR3 5-三磷酸肌醇受體3抗體 規(guī)格: 0.2ml
NHE1/APNH1 鈉通道蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlTMEM74 跨膜蛋白74抗體 規(guī)格: 0.2ml
FAM82A1/RMD2 微管動力調(diào)節(jié)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-CDKN1A/P21 (Thr57) 磷酸化p21蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
NALP4 /睪抗原58抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-C-Myc(Thr373) 磷酸化致基因C-Myc抗體 規(guī)格: 0.1ml
5HTR3B/5HT3B receptor 5-羥色胺受體3B抗體 0.1mlPhospho-TIF1 beta(Ser824) 磷酸化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體 規(guī)格: 0.1ml
注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時間不夠，可以延長反應(yīng)時間（反應(yīng)時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
5
環(huán)保在線