目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 單寧含量測試盒微量法
商品介紹:
測定意義: 單寧是一類廣泛存在于植物體內(nèi)的多元酚化合物,又稱植物多酚。具有*的化學性質(zhì)和多種生理活性,如能與蛋白質(zhì)、生物堿、多糖結合;能與多種金屬離子發(fā)生絡合或靜電作用;具有止血、抑制微生物、抗過敏、抗突變、抗腫瘤、抗衰老等生理活性。 測定原理: 單寧在堿性環(huán)境下與磷鉬酸反應,生成藍色化合物,在760nm處有最大吸收峰。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽和蒸餾水。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
單寧含量測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6456 |
實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質(zhì)要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH8.0 Phosphate Buffer,0.2M, pH8.0 常溫保存
0.1mL×10 Tuner(DE3) 感受態(tài)細胞 Tuner(DE3) Competent Cell -80℃保存
2 ug pOPRSVI/MCS pOPRSVI/MCS 低溫運輸,-20℃保存
3%NaCl 20支
1瓶 UMNSAH/DF-1細胞株 UMNSAH/DF-1 低溫運輸和保存
Kovcas氏靛基質(zhì)試劑盒 5ml*2
1g D- 半乳糖醛酸 D-(+)-Galacturonic Acid Monohydrate 室溫干燥保存
50T 呼吸道合胞病毒B組PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
100µL 山羊抗兔IgG(Fc),堿性標記 Goat Anti-Rabbit IgG(Fc),AP Conjugate -20℃保存
2 ug pBiFC-bFos(ΔZIP)VC155 pBiFC-bFos(ΔZIP)VC155 低溫運輸,-20℃保存
100mL 通用洗柱液
單寧含量測試盒微量法C12ORF49 12號染色體開放閱讀框49抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Zap-70 (Tyr315/Tyr319) 磷酸化zeta相關蛋白70抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-PFKL (Ser775) 磷酸化6磷酸果糖激抗體 規(guī)格: 0.1ml
CA153/EMA/Mucin-1 subunit alpha 相關抗原抗體 0.1ml
CD54/ICAM-1 細胞間粘附分子-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Avidin/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗親和素 規(guī)格: 0.1ml
phospho-Bim(Ser87) 磷酸化細胞死亡調(diào)解子抗體 規(guī)格: 0.1ml
C9orf152 9號染色體開放閱讀框152抗體 規(guī)格: 0.2ml
SPA-1/SIPA-1 信號應增相關蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
GRAMD3/NS3TP2 丙型毒-NS3反轉(zhuǎn)錄激活蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
MSH γ1 促黑細胞激素γ1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Donkey Anti-human IgG/HRP 辣根過氧化物標記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml