目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 花青素還原酶（ANR）測(cè)試盒微量法
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更新時(shí)間：2023-12-28 16:54:15瀏覽次數(shù)：415評(píng)價(jià)
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| 貨號(hào) | BK-01S6466 |
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注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min）。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè)，通常可以使測(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：花青素還原酶（ANR）測(cè)試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
檢測(cè)方法：微量法
產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6466
產(chǎn)品分類：氧化與抗氧化系列
商品介紹：
測(cè)定意義: 花青素還原酶是黃酮合成途徑中的關(guān)鍵酶，在植物體內(nèi)起非常重要的調(diào)控作用，對(duì)花青素還原酶的調(diào)控機(jī)制研究有利于從基因水平改變植物的品質(zhì)。 測(cè)定原理： 花青素還原酶在NADPH存在的條件下作用于飛燕草色素轉(zhuǎn)變?yōu)楸頉]食子兒茶素和NADP，使反應(yīng)體系在340nm處的吸光值下降，吸光值下降速率反應(yīng)了花青素還原酶的活性。 需自備的儀器和用品： 天平、研缽、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
亮綠乳糖膽鹽培養(yǎng)液（BGB） Brilliant Green Lactose Bile Broth 250g
1瓶 MEF細(xì)胞株 MEF 低溫運(yùn)輸和保存
MI培養(yǎng)基 MI Medium 1000ml
5g 腺硫酸鹽 Adenine Sulfate 避光保存
100mL TEA Buffer,0.2M,pH7.0 TEA Buffer,0.2M,pH7.0 常溫保存
10g 甜菜堿 Betaine 4℃保存
2 ug pGCsi/H1/Neo/GFP Survivin pGCsi/H1/Neo/GFP Survivin 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
抗生素檢定培養(yǎng)基6號(hào) Antibiotic Agar NO.6 250g
1瓶 Dami細(xì)胞株 Dami 低溫運(yùn)輸和保存
含接觸皿培養(yǎng)基平板（5.5cm） Contact Plate Medium 10個(gè)/包
1000U 大腸桿菌DNA連接（E.coli Ligase） E. coli DNA Ligase -20℃保存
花青素還原酶（ANR）測(cè)試盒微量法PMP2 周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlMAL/MPV17 T淋巴細(xì)胞成熟相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-PRKAA2(Ser173) 苷單磷酸活化蛋白激α2抗體 規(guī)格: 0.1mlMARCH1 膜相關(guān)環(huán)指蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
L-Citrulline L-瓜抗體 規(guī)格: 0.2mgABHD13 水解結(jié)構(gòu)域蛋白13抗體 規(guī)格: 0.2ml
FAST kinase Fas活化的絲/蘇激抗體 規(guī)格: 0.1mlUBE2A/UBE2B/RAD6 泛素結(jié)合E2蛋白A抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-LSP1 (Ser252) 磷酸化白細(xì)胞F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlHIF3 alpha 缺氧誘導(dǎo)因子3α/HIF-3α抗體 規(guī)格: 0.1ml
CT DNA(calf thymus DNA) 小牛胸DNA抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
FRMD5 FRMD5蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
NOX2/gp91phox NADPH氧化2抗體 規(guī)格: 0.1ml
FLAG Tag (NT) FLAG Tag標(biāo)簽抗體（N端） 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml
phospho-RPS6KB1(Ser441+Thr444) 磷酸化核糖體S6蛋白激抗體 規(guī)格: 0.1ml
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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