目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>輔酶Ⅱ系列>> 脂肪酸合成酶（FAS）測試盒微量法
| 貨號(hào) | BK-01S6365 |
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實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招：
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封，放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應(yīng)將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存，其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng)，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風(fēng)處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號(hào) |
脂肪酸合成酶（FAS）測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6365 |
商品介紹：
測定意義: 細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的積累是脂質(zhì)合成與分解失衡的結(jié)果。脂肪酸合成增多，而氧化分解降低，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)積累。FAS是脂肪酸合成關(guān)鍵酶，催化乙酰和丙二酰而生成長鏈脂肪酸。FAS普遍表達(dá)于各種組織細(xì)胞中，在哺乳動(dòng)物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達(dá)豐富。 測定原理 以NADPH為還原力，FAS催化乙酰CoA和丙二酰CoA生成長鏈脂肪酸；通過測定NADPH的減少量，即可推算出FAS活性。 實(shí)驗(yàn)中所需儀器和用品 研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍和雙蒸水。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
操作步驟：
1. 樣品的準(zhǔn)備：
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集細(xì)胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備：動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定，可以冰浴保存；如果當(dāng)天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋，即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進(jìn)行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品，但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
幽門螺旋桿菌培養(yǎng)基（液體） Helicobacter Pylori Medium 250g
1瓶 RBL-1細(xì)胞株 RBL-1 低溫運(yùn)輸和保存
膽汁肉湯 Bile Broth 100g
1g Cyclophosphamide Monolydrate 4℃保存
50T 蠶微粒子病PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
30次 一站式長效期SDS-PAGE電泳套裝 （適合30 kD以上蛋白） One-Stop Stable SDS-PAGE Pack 4℃保存（上樣緩沖液需要-20℃保存）
2 ug pYADE4 pYADE4 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
30次 線狀DNA清除劑 Linear DNA Erasol 常溫保存（溶液A需要低溫運(yùn)輸，-20℃保存）
2 ug pET-Trx pET-Trx 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
改良緩沖蛋白胨水（MBP） Modified Buffered Peptone Water 250g
2 ug pDG1363 pDG1363 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
脂肪酸合成酶（FAS）測試盒微量法MFAP3L 微絲相關(guān)蛋白3樣抗體 規(guī)格: 0.1ml
TASK 3/KCNK9 酸敏性鉀離子通道蛋白抗體 0.2ml
phospho-Crkl(Tyr244) 磷酸化接蛋白CrkL抗體 規(guī)格: 0.1ml
VGLUT1/BNP1 腦特異性鈉依賴無機(jī)磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Integrin β1/CD29 整合素β1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Sertad1 調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激SEI1抗體 規(guī)格: 0.1ml
FABPB 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
STK38 絲/蘇蛋白激38抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.1ml
NPTX1 神經(jīng)細(xì)胞正五聚體1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
C19orf54 19號(hào)染色體開放閱讀框54抗體 規(guī)格: 0.2ml
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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