目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>輔酶Ⅰ系列>> 乙醛脫氫酶(ALDH)測(cè)試盒紫外分光光度法
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更新時(shí)間:2023-12-29 11:58:56瀏覽次數(shù):486評(píng)價(jià)
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貨號(hào) | BK-01S6348 |
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注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱:乙醛脫氫酶(ALDH)測(cè)試盒紫外分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
檢測(cè)方法:紫外分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6348
產(chǎn)品分類:輔酶Ⅰ系列
商品介紹:
測(cè)定意義: 乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種,廣泛存在于各種動(dòng)物、植物和微生物體內(nèi)。主要作用是將乙醛氧化成乙酸,在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動(dòng)物體內(nèi),線粒體乙醛脫氫酶能把對(duì)生物體有害的醇類轉(zhuǎn)化,所以在細(xì)胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關(guān)注;同時(shí),乙醛脫氫酶在分子生物學(xué)以及相關(guān)疾病的檢測(cè)方面有較廣泛的研究應(yīng)用。 測(cè)定原理 在輔酶Ⅰ存在的條件下,乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉(zhuǎn)化為乙酸和NADH,在340nm處的吸光值會(huì)增加,測(cè)定340nm處的吸光值變化,可計(jì)算得到乙醛脫氫酶的活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
500U 限制性內(nèi)切MboI Restriction Endonuclease -20℃保存
1kit Protein Coupling Kit Protein Coupling Kit 常溫保存
1個(gè) 暗盒(8×10英寸) Cassette 室溫
100mL 甲酰胺 Formamide 4℃保存
50T 鉤端螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
100mg AMPPD AMPPD 4℃保存
2 ug T-Rex system T-Rex system 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
10g 酸洗玻璃珠(直徑:200μm) 常溫
2 ug pAcAd5 CMVK-NpA pAcAd5 CMVK-NpA 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
含TSA平板 9cm*10/包
1瓶 BGC-803細(xì)胞株 BGC-803 低溫運(yùn)輸和保存
乙醛脫氫酶(ALDH)測(cè)試盒紫外分光光度法DNAI1/Dynein intermediate chain 1 軸絲中鏈動(dòng)力蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-ODF2(Ser796) 磷酸化子尾部結(jié)構(gòu)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
TPST1 酪蛋白硫酸轉(zhuǎn)移1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Histone H4 組蛋白H4抗體 規(guī)格: 0.1ml
CX3CR1 趨化因子受體1抗體 規(guī)格: 0.2ml
PKC delta 蛋白激C亞性D型抗體 規(guī)格: 0.2ml
CCDC28B 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28B抗體 規(guī)格: 0.2ml
Livin 凋亡抑制蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
KLHL13 kelch樣蛋白13抗體 規(guī)格: 0.2ml
HDLBP/vigilin 高密度脂蛋白結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
FGF17 成纖維細(xì)胞生因子17抗體 規(guī)格: 0.2ml
Synaptotagmin 1/SYT1 突觸結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)