目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞分物學(xué)>>細(xì)胞培養(yǎng)>> 1×106人表皮干細(xì)胞
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。公司產(chǎn)品僅用于科研,不得用于臨床.
產(chǎn)品名稱 | 人表皮干細(xì)胞 |
英文名稱 | ESC |
規(guī)格 | 1×106 |
細(xì)胞接受后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的的*培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代。
5) 接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
腺苷酸環(huán)化酶9抗體
SW579 [SW 579; SW-579]人甲狀腺鱗癌細(xì)胞 SW579 [SW 579; SW-579] in human thyroid carcinoma cells L-15培養(yǎng)基+10%FBSTrans-2-Hexenoicacid反-2-己1酸5克CP,96%
IL4 Protein Canine 重組狗 IL4 / Ierleukin-4 蛋白2-羌基-3-氧基本全 3-Mqthoxysclicylcldqhydq 148-23-8
人成纖維母細(xì)胞-胎兒(HDF-f)( 5×105 ) MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞 MouseTBAF四正丁基扶化5克3N,0.1×100㎜
口腔角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基OKM-prf哥倫比亞CAN瓊脂基礎(chǔ)100毫升
RET Others Human 人 RET Kinase (aa 658-1114) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 35271-74-03-(4-)戊二酸, 98%3-(4-Chloropxenyl)glutaric acid
組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)/1ml左乙拉西坦Levetiracetam質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,USP
MET Others Rat 大鼠 c-MET / HGFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 左乙拉西坦(標(biāo)準(zhǔn)品)Levetiracetam質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人胰腺腺泡上皮癌;HPAC鹽酸林可霉素Lincomycin HCl質(zhì)量規(guī)格:>850mcg/mg,BR
HMC細(xì)胞,人腎小球系膜細(xì)胞 產(chǎn)EBV的絨猴白細(xì)胞,B95-8細(xì)胞 CL-0218SPC-A-1(人肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸林可霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Lincomycin HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測定
WI-38(人胚肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2三代甲狀腺素鈉鹽Liothyronine 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%,BR
人表皮干細(xì)胞人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞總RNAHCPF NA丁二酸二甲酯(>99%,BR)Dimethyl succinate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
CD83 Others Mouse 小鼠 CD83 / HB15 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二甲基甲酮鈉鹽(>97%,BR)Dimethylglyoxime salt質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
U87MG 人惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞直接藍(lán)71(≥50%,BR)Direct blue 71質(zhì)量規(guī)格:≥50%,BR
CL-0307SW1116(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2天狼猩紅Direct red 80質(zhì)量規(guī)格:BS
RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞DL-苯甘氨酸(>98%,BC)DL-alpha-Phenylglycine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
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