目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>細胞分物學(xué)>>細胞培養(yǎng)>> 人尿道上皮細胞
細胞接受后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的的*培養(yǎng)基。
4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。
5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
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產(chǎn)品名稱 | 人尿道上皮細胞 |
英文名稱 | HUC |
規(guī)格 | 詳見說明 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
1.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
腺苷酸環(huán)化酶9抗體
細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
IL7R Others Rat 大鼠 IL7R / IL7RA 人細胞裂解液 (陽性對照) CIN-1I培養(yǎng)基50克
人呼吸道上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL4-安基偶氮本;隊安基偶氮本;安泥林皇;本安皇;隊安基二本基亞安;隊本基偶氮本安 4-cMinoczobqnzqnq;p-cMino-czobqnzqnq;p-cMinodiphqnyliMidq;cnilinq yqllow;Spirit yqllow;Oil yqllow B;p-Phqnylczocnilinq;C.I.11000; 1960-9-3
U2OS-Luc teT-on細胞,熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細胞 枯草芽孢桿菌 小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1聚乙酸酯50克RT
CCL3 Protein Human 重組人 CCL3 / Mip1a 蛋白 (His 標簽)TotalBLOTSOUTHERNKITWITHMEMBRANESOUTHERN 試劑盒(含膜)生物技術(shù)級RTsigma
LoVo(人大腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人 EDNRB / Endothelin B Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 4號瓊脂NA
大鼠肝細胞;BRL 3A托伐普坦 Tolvaptan質(zhì)量規(guī)格:度≥99.0%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
GDF15 Others Human 人 GDF-15 人細胞裂解液 (陽性對照) 磺胺噻唑Sulfathiazole質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠胚胎成纖維細胞MEF磺胺噻唑(標準品)Sulfathiazole質(zhì)量規(guī)格:含量測定
MARK3 Others Human 人 MARK3 / CTAK1 / EMK-2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 環(huán)苯扎林鹽酸鹽Cyclobenzaprine HCl質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1鹽酸美托咪定Medetomidine HCl質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR
人尿道上皮細胞HCT116/L 人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑耐藥株alpha-熊果苷(標準品)alpha-Arbutin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
SEMA4D Others Mouse 小鼠 Semaphorin-4D / SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照) L-羥基脯氨酸(標準品)L-Hydroxyproline質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細胞株;7WCY1.0L-羥基脯氨酸L-Hydroxyproline質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人細胞裂解液 (陽性對照) L-正亮氨酸L-Norleucine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人臍帶單核細胞*培養(yǎng)基 100mLFmoc-D-4-苯丙氨酸Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%
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