目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞分物學(xué)>>細(xì)胞培養(yǎng)>> 人腎小管上皮細(xì)胞
細(xì)胞接受后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的的*培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進行細(xì)胞傳代。
5) 接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
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產(chǎn)品名稱 | 人腎小管上皮細(xì)胞 |
英文名稱 | HK-2 |
規(guī)格 | 詳見說明 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
腺苷酸環(huán)化酶9抗體
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
星形細(xì)胞生長添加物AGS馬來酸,英文名或英文縮寫:Maleic acid,級別:USP級,50萬u/g,規(guī)格:25克
TE 354.T細(xì)胞,人皮膚基底細(xì)胞癌 人胚腎細(xì)胞,AAV-293細(xì)胞 原代單核細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml2-基炳1;異;1,1-二基1 2-Mqthylpropqnq;Isobutqnq; Isobutylqnq;1,1-DiMqthylqthylqnq 112-11-7
盤羊皮膚細(xì)胞;ASHS3腺甙脫酶,英文名或英文縮寫:ADA,級別:BR,10u/ul,規(guī)格:1克
S100A1 Others Human 人 S100A1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-絲酸鹽酸鹽100克
T-104AII型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mLPHA-P 5mg/10mg Sigma分裝
GHR Others Mouse 小鼠 GHR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 肉桂酸(標(biāo)準(zhǔn)品)trans-Cinnamic acid質(zhì)量規(guī)格:GC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
細(xì)胞凍存液CFM瑞香素/祖師麻甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)Daphnetin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
FLT3 Others Mouse 小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三氯蔗糖(標(biāo)準(zhǔn)品)Sucralose質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人胃腺癌細(xì)胞;BGC-823三七皂甙R1(標(biāo)準(zhǔn)品)Notoginsenoside R1質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CCC-HEL-1細(xì)胞,人胚肝二倍體細(xì)胞 小鼠腹水瘤細(xì)胞,SAC-II B2細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴細(xì)胞;B95-8三葉豆紫檀苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Trifolirhizin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人腎小管上皮細(xì)胞BNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M046小鼠腸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞;RPMI-8226 [RPMI8826]2-溴-9,9-二甲基芴(>98.0%(GC))2-Bromo-9,9-dimethylfluorene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS42,7-二氨基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Diaminofluorene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 9-溴-10-苯基蒽(>98.0%(GC))9-Bromo-10-phenylanthracene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL2-氯蒽(>98.0%(GC))2-Chloroanthracene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
SK23細(xì)胞,人色素瘤細(xì)胞 嗜熱乳酸鏈球菌 人腦瘤細(xì)胞;SF179,10-二氯蒽(>96.0%(GC))9,10-Dichloroanthracene質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)
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