目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞分物學(xué)>>細(xì)胞培養(yǎng)>> 小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時提供最新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。公司產(chǎn)品僅用于科研,不得用于臨床.
產(chǎn)品名稱 | 小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞 |
英文名稱 | B16-F10 |
規(guī)格 | 詳見說明 |
細(xì)胞接受后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的的*培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代。
5) 接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
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細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
腺苷酸環(huán)化酶9抗體
CD177 Others Human 人 CD177 / PRV-1 / PRV1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) eetonitnILE*NOAIRSHIPMENT*以HPLC級4L1975-5-8RT
人內(nèi)皮細(xì)胞HDLEC2-錄酰安;錄酰安 2-ChloroccqtcMidqClCH2CONH2;2-ChloroqthcncMidq 1979-7-
Hs 1.Tes細(xì)胞,正常人細(xì)胞 人癌細(xì)胞,Hs-578T細(xì)胞 心肌細(xì)胞培養(yǎng)基CMMCHAPSOCHAPSO蛋白組學(xué)級10G82473-24-3RT
大額牛皮膚細(xì)胞;BFR-S3甲基紅250克
KLK13 Others Human 人 KLK13 / Kallikrein-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4432-31-92-嗎啉乙磺酸MES
HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2利伐沙班(標(biāo)準(zhǔn)品)Rivaroxaban質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Promocell C-22022 Endothelial Cell GrowthMedium MV2, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基MV2(即用型) 500ml阿哌沙班Apixaban質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,選擇性活化Ⅹ因子抑制劑
人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞裂解物HHGMCL哌立福新(KRX-0401)Perifosine質(zhì)量規(guī)格:>98%,蛋白激酶B(Akt)信號通路阻斷劑
IL17RB Others Human 人 IL17RB / IL-17 Receptor B 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸阿那格雷Anagrelide 質(zhì)量規(guī)格:>98%
人低分化肺腺癌細(xì)胞;SK-LU-1甲磺酸沙奎拉韋Saquinavir mesylate質(zhì)量規(guī)格:>98%
小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞VEGFA Protein Human 重組人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 蛋白剛果紅(AR)質(zhì)量規(guī)格:ARCongo red
大鼠腎臟管狀上皮細(xì)胞(RRTEpiC)(5×105) RL95-2, 人內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系 Human鈣羧酸指示劑(AR)質(zhì)量規(guī)格:ARCalconcarboxylic acid
成纖維細(xì)胞生長添加物-2FGS-2溴化乙錠(EB)質(zhì)量規(guī)格:>95%Ethidium bromide(EB)
PRDX2 Others Human 人 Peroxiredoxin 2 / PRDX2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 貝西沙星鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRBesifloxacin HCl
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;HH-16甜菜堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Betaine
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
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