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注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

產(chǎn)品名稱： 柱式動物DNA提取試劑盒
規(guī)格： 50次
貨號：BK-P96321
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。

特點(diǎn)優(yōu)勢：
   1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
   2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
   3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
   4.   實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
   6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。

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人載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA Kit    Human apo-A5 ELISA Kit

人載脂蛋白A4(Apo-A4)ELISA Kit    Human Apo-A4 ELISA Kit

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人孕烯醇酮(PREG)ELISA Kit    Human pregnenolone,PREG ELISA kit

人孕酮受體(PGR)ELISA Kit    Human PGR ELISA Kit

Bolton肉湯基礎(chǔ)     250g     用于空腸彎曲菌的選擇性增菌(GB)，每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基需添加1支配套試劑(SR0340)

哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基     250g     滅菌后冷至45℃左右時加入5%脫纖維羊血，用于空腸彎曲菌的培養(yǎng)。(CP、GB、EP、USP)

高氏合成1號瓊脂培養(yǎng)基     250g     供放線菌培養(yǎng)用。

血平板 (成品培養(yǎng)基)     20個/盒     用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)

哥倫比亞血平板(成品培養(yǎng)基)     20個/盒     用于一般病原菌的分離培養(yǎng)和溶血性細(xì)菌的鑒別

改良克氏雙糖培養(yǎng)基     250g     用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的鑒定

硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基     250g     用于鑒別綠膿桿菌分解硝酸鹽產(chǎn)氣試驗(yàn)

半固體瓊脂     250g     供細(xì)菌動力觀察、菌種保存，H抗原位相變異試驗(yàn)等。(美國FDA、SN、GB)

3%氯化鈉三糖鐵瓊脂     250g     用于副溶血性弧菌的生化反應(yīng)。(GB、SN)

血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)     250g     加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)

苯丙氨酸培養(yǎng)基     100g     用于鑒別細(xì)菌利用銨鹽作為氮源并分解葡萄糖的試驗(yàn)。

葡萄糖銨培養(yǎng)基     100g     用于鑒別細(xì)菌利用銨鹽作為氮源并分解葡萄糖的試驗(yàn)。

尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)     250g     用于鑒別腸道菌尿素酶試驗(yàn)

緩沖動力-硝酸鹽培養(yǎng)基     250g     供產(chǎn)氣莢膜梭菌動力和硝酸鹽還原測定用

動力—硝酸鹽培養(yǎng)基(A法)     250g     供鑒別測定細(xì)菌液化明膠用

明膠培養(yǎng)基(營養(yǎng)明膠)     100g     供測定細(xì)菌液化明膠使用

克氏雙糖鐵瓊脂     250g     用于鑒別腸道菌發(fā)酵葡萄糖和乳糖，及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)。(ISO)

緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培養(yǎng)基、磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基)     250g     用于MR和VP試驗(yàn)

Koser氏枸椽酸鹽肉湯     100g     用于細(xì)菌的枸櫞酸鹽的試驗(yàn)

西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基     100g     用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(yàn)

蛋白胨水 (靛基質(zhì)培養(yǎng)基)     100g     供鑒別細(xì)菌能否產(chǎn)生靛基質(zhì)的生化反應(yīng)

糖發(fā)酵培養(yǎng)基基礎(chǔ)     250g     加入各種糖類，供鑒別各種需氧菌對糖類的發(fā)酵反應(yīng)用

氨基酸脫羧酶試驗(yàn)基礎(chǔ)培養(yǎng)基     250g     供鑒別腸道菌屬能否產(chǎn)生氨基酸脫羧酶用

三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI)藥典     250g     用于鑒別腸道菌發(fā)酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)（《中華人民共和國藥典》2010年版...

柱式動物DNA提取試劑盒三糖鐵瓊脂(TSI)     250g     用于鑒別腸道菌發(fā)酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)

葡萄糖銨培養(yǎng)基     100g     用于鑒別細(xì)菌利用銨鹽作為氮源并分解葡萄糖的試驗(yàn)(GB/T4789.28－2003 中3.8，GB/T4789.5－20...

尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)     250g     用于鑒別腸道菌尿素酶試驗(yàn) (GB4789.4－2010，《中華人民共和國藥典》2010年版，SN0170-92和GB130...

緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培養(yǎng)基、磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基)     250g     用于MR和VP試驗(yàn)