目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>基因檢測(cè)PCR試劑盒>>RNA/DNA提取試劑盒>> 50次柱式動(dòng)物線粒體DNA提取試劑盒
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更新時(shí)間:2023-12-31 19:30:04瀏覽次數(shù):717評(píng)價(jià)
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產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
產(chǎn)品名稱(chēng):柱式動(dòng)物線粒體DNA提取試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格: 15次
產(chǎn)品貨號(hào):BK-P96328
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無(wú)熒光, R與Q分開(kāi),發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對(duì)定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對(duì)定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
potewwiumFERRICYANIDE鐵ACS級(jí)暗橙色結(jié)晶RTsigma 小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA試劑盒 ,英文名: α-Gal ELISA Kit
紫丁香酚苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Syringin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 犬抑制素β-B(Inhbb)試劑盒 Canine inhibin beta-B,Inhbb ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
竹節(jié)參皂苷IVa(標(biāo)準(zhǔn)品)chikusetsu saponin Iva質(zhì)量規(guī)格:供含量測(cè)定用 英文名稱(chēng)MouseBTCELISAKit小鼠BTCELISAKit規(guī)格:96T/48T 豬生長(zhǎng)激素受體(GHR)試劑盒 Pig growth hormone receptor,GHR ELISA Kit
毛蘭素(標(biāo)準(zhǔn)品)3'-Hydroxy-3,4,4',5-tetraMethoxybibenzyl質(zhì)量規(guī)格:供含量測(cè)定用 冰凍切片組織組蛋白H3-K9甲基化熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 HumanIerleukin17,IL-17ELISAKit 人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
石斛酚(標(biāo)準(zhǔn)品)dendrophenol質(zhì)量規(guī)格:鑒別 RatFattyacyl-CoAsyhetase,ACSELISA試劑盒大鼠脂酰輔酶A合成酶(ACS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T HumanMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISA試劑盒人巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
維生素B1Vitamin B1質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP 英文名稱(chēng)MouseS100ELISAKit小鼠S100規(guī)格:96T/48T 人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
維生素B12(標(biāo)準(zhǔn)品)vitamin B12質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品 冰凍切片組織GSK-3BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)試劑盒 Rabbit hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit
10-十一炔-1-醇(>95.0%(GC))10-Undecyn-1-ol質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) RatC-ReactiveProtein,CRPELISA試劑盒大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三角形四肽重復(fù)蛋白1(TTC1/TPR1)ELISA試劑盒 ,英文名: TTC1/TPR1 ELISA Kit
亞甲基二水楊酸(異構(gòu)體的混合物)(>90.0%(T))Methylenedisalicylic Acid (mixture of isomers)質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(T) 小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒 ,英文名: APC ELISA Kit PorcineOrexieceptor,OXRELISA試劑盒豬食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
柱式動(dòng)物線粒體DNA提取試劑盒1,4-雙(5-本基-2-噁唑基)本shēng huà shì jì容量:2.5升 人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)免疫試劑盒 Human SHC/SLP-76 ELISA Kit
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