目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>基因檢測PCR試劑盒>>RNA/DNA提取試劑盒>> 電泳級SYBR Green I 10000X
產(chǎn)品僅用于科研原理是由一對引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱:電泳級SYBR Green I 10000X
產(chǎn)品規(guī)格: 詳見說明
產(chǎn)品貨號(hào):BK-P96745
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
Adipicacid1,6-己二酸250毫克PH=7 Human vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 人維生素D3(VD3)ELISA試劑盒
隱丹參酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cryptotanshinone 大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA檢測試劑盒Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit 96T/48T 人體CyclinA1基因甲基化檢測試劑盒20
隱丹參酮質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,BRCryptotanshinone 人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)試劑盒 human S100A9 ELISA Kit ELISAKitAFA人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體規(guī)格:48T/96T
牛磺鵝去氧膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Taurochenodeoxycholic acid 英文名稱MouseuPARELISAkit小鼠尿激酶型血漿酶原激活因子受體(uPAR)規(guī)格:96T/48T 大鼠孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒 ,英文名: PGR ELISA Kit
陰丹酮質(zhì)量規(guī)格:Indanthrone XTT比色法細(xì)胞繁殖測定試劑盒500 人補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA檢測試劑盒HumanCompleme4,C4ELISAKit 96T/48T
天青 B 曙紅質(zhì)量規(guī)格:sigma分裝Azure B eosinate 人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA檢測試劑盒HumanAquaporin5,AQP-5ELISAKit 96T/48T Humanapelin12,AP12ELISA試劑盒人apelin12(AP12)ELISAKi規(guī)格:96T/48T
利馬前列素質(zhì)量規(guī)格:>99%Limaprost 大鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒 Rat Aquaporin 2,AQP-2 ELISA Kit HumanCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit人Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
天青II曙紅質(zhì)量規(guī)格:BSAzure II eosinate 英文名稱RatHCGELISAKit大鼠絨毛促性腺激素(HCG)規(guī)格:96T/48T 人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
菲律賓菌素;非律平;Filipin質(zhì)量規(guī)格:sigma分裝Filipin complex from Streptomyces filipinensis 活化凝血因子12(FACTORXIIa)活性熒光定量檢測試劑盒20 兔p物質(zhì)(SP)試劑盒 Rabbit Substance P,SP ELISA Kit
電泳級SYBR Green I 10000XMC53細(xì)胞,小鼠腎系膜細(xì)胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤) 貓腎細(xì)胞;F81Azlocillinwo7ium咪芐西林鈉1KUUSP級,40u/mg
EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (His 標(biāo)簽)腺苷三鱗醋雙鱗醋酶(-20°C) cPYRcSq 9000-92-7
BGC-803(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細(xì)胞;15P-1Tantalum鉭粉500毫克基準(zhǔn)試劑,99.95%
人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞HIBEpiCTr
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)