目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>基因檢測PCR試劑盒>>RNA/DNA提取試劑盒>> Tth DNA聚合酶
產(chǎn)品名稱:Tth DNA聚合酶
規(guī)格: 詳見說明
貨號:BK-P96817
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
TAPS,wo7iumSALTTAPS Na生物技術(shù)級100G91000-53-2RT 大鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA檢測試劑盒Ratmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISAkit 96T/48T
乙基4-羥基-2-甲基-2H-1,2-并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物(吡羅昔康雜質(zhì) K)質(zhì)量規(guī)格:美國進口Ethyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide(Piroxicam Impurity K) ELISAKitPGM人1酸葡萄糖變位酶規(guī)格:48T/96T 大鼠Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)試劑盒 Rat procollagen type III,HPCⅢ ELISA Kit
異丙基 4-羥基-2-甲基-2H-1,2-并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物 (吡羅昔康雜質(zhì) L)質(zhì)量規(guī)格:美國進口Isopropyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide (Piroxicam Impurity L) 小鼠CD8分子(CD8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 CLIAKitforS100A9(HumanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB)ELISAKit人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B規(guī)格:48T/96T
沙卡林N-(2-醋酸異丙基酯)(吡羅昔康雜質(zhì) F)質(zhì)量規(guī)格:美國進口Saccharin N-(2-Acetic Acid Isopropyl Ester)(Piroxicam Impurity F) Rat pepsin (Pepsin) ELISA Kit 大鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA試劑盒 石蠟切片1脂尼羅紅(NileRed)直接熒光染色試劑盒50
甲磺酸齊拉西酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定Ziprasidone mesilate Humancatecholamine,CAELISAKit 人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 ELISAKitAPC人活化蛋白C規(guī)格:48T/96T
蒜氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Alliin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 冰凍切片組織BAX蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 登革熱病毒通用型(DFV-U)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
L-脯氨酸L-Proline質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR RatClusterofdiffereiation3,CD3ELISA試劑盒大鼠CD3分子(CD3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T HumanProteinSELISA試劑盒人蛋白S(ProteinS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-纈氨酸DL-Valine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠血小板/內(nèi)皮細胞粘附分子1(PECAM1)ELISA試劑盒 ,英文名: PECAM1 ELISA Kit ELISAKitapo-A1小鼠載脂蛋白A1規(guī)格:48T/96T
L-亮氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Leucine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 牛1酸烯醇式酸羧激酶(PCK)ELISA檢測試劑盒Bovinephosphoenolpyruvatecarboxykinase,PCKELISAKit 96T/48T Humancolony-stimulatingfactor,CSFELISAKit人集落刺激因子(CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Tth DNA聚合酶人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細胞株(HEK293);APP-PS1酸鈣,英文名或英文縮寫:Calcium iodate,級別:AR,99%,規(guī)格:5克
SUNE-1細胞,低分化鼻咽癌細胞系 鼠色素瘤細胞系,B16-Fo細胞 CM-H031人食管上皮細胞*培養(yǎng)基100mLε-己內(nèi)酯 6-Hqxcnolcctonq 20-44-3
NR8383(大鼠肺泡巨噬細胞) 5×106cells/瓶×2葛根素,英文名或英文縮寫:Puerarin,級別:BR,粘度50 mpe.s,規(guī)格:10克
Promocell C-2
注意事項:產(chǎn)品僅用于科研1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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