目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>基因檢測(cè)PCR試劑盒>>RNA/DNA提取試劑盒>> Taq DNA polymerase Storage Buffer
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更新時(shí)間:2024-01-01 19:25:53瀏覽次數(shù):406評(píng)價(jià)
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注意事項(xiàng):產(chǎn)品僅用于科研1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱:Taq DNA polymerase Storage Buffer
規(guī)格: 詳見(jiàn)說(shuō)明
貨號(hào):BK-P96824
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
70-25-71-甲基-3-硝基-1-亞肖級(jí)胍(+4℃)1-metxyl-3-nitno-1-nitnosoguanidine 人N-乙?;?/span>-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)免疫試劑盒 Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit
胰高血糖素樣肽-2(1-34),人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRGLP-2 (1-34) (human) ELISAKitNGB人腦紅蛋白規(guī)格:48T/96T 過(guò)氧化物酶(POD)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
胰高血糖素(1-29),牛,人,豬質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRGlucagon (1 - 29), bovine,human, porcine 小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)ELISA試劑盒 ,英文名: S100A9 ELISA Kit RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISA試劑盒大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
胰高血糖素(19-29),牛,人,豬質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRGlucagon (19 - 29), bovine,human, porcine 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 96T/48T HumanHerpessimplexvirusⅡaibody,HSVⅡ-AbELISA試劑盒人單皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
胰高血糖素樣肽Ⅰ(7-36)酰胺,人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRGlucagon-Like Peptide I (7-36),amide, human 大鼠色素細(xì)胞抗體(MC Ab)試劑盒 Rat melanocyte aibody,MC Ab ELISA Kit HumanlymphocytefactorELISAKit人細(xì)胞因子ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酸性紅88 Acid Red 88質(zhì)量規(guī)格:AR,進(jìn)分 小鼠血小板因子4(PF4)ELISA試劑盒 ,英文名: PF4 ELISA Kit ELISAKitIFN-γ鴨γ干擾素規(guī)格:48T/96T
酸性紅183Acid Red 183質(zhì)量規(guī)格: 兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T HumanCreatineKinaseMBisoenzyme,CK-MBELISAKit人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酸性紅9Acid Red 9質(zhì)量規(guī)格:AR,進(jìn)分 犬半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)試劑盒 Canine Cystatin C,Cys-C ELISA Kit 人神經(jīng)降壓素()ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
孔雀石綠Malachite green質(zhì)量規(guī)格:BS 英文名稱HumanPlaceaGrowthFactor,PIGFELISAkit人肽盤(pán)生長(zhǎng)因子(PLGF)規(guī)格:96T/48T 小鼠抑制素A(INH-A)試劑盒 Mouse Inhibin A,INH-A ELISA Kit
Taq DNA polymerase Storage Buffer中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;CHL[Phe2,Orn8]-催產(chǎn)素質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Phe2,Orn8]-Oxytocin
BxPC-3細(xì)胞,人原位胰腺腺癌細(xì)胞 人皮膚纖維微細(xì)胞系,Malmc細(xì)胞 小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11[Ser4,Ile8]-催產(chǎn)素質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Ser4,Ile8]-Oxytocin
HT-1080(人纖維肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2[Tyr34]-甲狀旁腺激素(7-34) 酰胺 (牛)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Tyr34]-pTH (7-34) amide (bo
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