目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>PCR試劑盒>>源性成分PCR試劑盒>> 48T /50T豬源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品名稱:豬源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法
產(chǎn)品規(guī)格: 48T /50T
產(chǎn)品貨號:BK-P97200
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品特點:
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強,反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
甲磺酸酚妥拉明(標(biāo)準(zhǔn)品)Phentolamine mesilate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98.5%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor,GM-CSFELISAKit大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV IgM)ELISA試劑盒 48T/96T 試劑盒 組裝/原裝
維羅非尼,RG7204Vemurafenib,PLX 4032質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,B-Raf
芥酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Erucic acid Porcinethyroopin-releasinghormone,HELISA試劑盒豬促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 球蛋白G1(IgG1)ELISA試劑盒 ,英文名: IgG1 ELISA Kit
a-硫丹(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品α-Endosulfan 小鼠泛素(Ub)ELISA試劑盒 ,英文名: Ub ELISA Kit RatAngiotensinⅡconveingenzyme,ACEⅡELISA試劑盒大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
a-硫丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=5%)質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=5%α-Endosulfan solution 人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GL1)ELISA檢測試劑盒HumanGlucoseanspoer1,GL1ELISAKit 96T/48T HumanCCAAT/enhancerbindingproteinepsilon,C/EBPεELISA試劑盒人CCAAT增強子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氯氟吡氧乙酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Fluroxypyr 大鼠(HYD)試劑盒 Rat Hydrocoisone,HYD ELISA Kit Humandynorphin,DynELISAKit人強啡肽(Dyn)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)細胞HRA拉寧A2 質(zhì)量規(guī)格:美國進口Teicoplanin A2
LAMP1 Others Rat 大鼠 LAMP1 / CD107a 人細胞裂解液 (陽性對照) 泰諾福韋1酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口Tenofovir Phosphate
大鼠小腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mLMono-POC泰諾福韋質(zhì)量規(guī)格:美國進口Mono-POC Tenofovir
Dami人巨核細胞白血病細胞 Dami human megakaryocytic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSN-去甲基特比萘芬質(zhì)量規(guī)格:美國進口N-Desmethyl Terbinafine
FGF18 Protein Human 重組人 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 標(biāo)簽)(Z) 4-羥基乙基它莫西芬-d5質(zhì)量規(guī)格:美國進口(Z) 4-Hydroxy Tamoxifen Ethyl-d5
豬源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法人牙齦成纖維細胞總RNAHGF NA4,4'-雙(甲氨基)二苯甲酮(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)4,4'-Bis(methylamino)benzophenone
小鼠星形膠質(zhì)細胞(MA)(5×105)2,4'-二氯二苯甲酮(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)2,4'-Dichlorobenzophenone
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-212,2'-二羥基-4,4'-二甲氧基二苯甲酮(>90.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)2,2'-Dihydroxy-4
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)