目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>PCR試劑盒>>源性成分PCR試劑盒>> 48T 0.2PCR管牛源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法
產(chǎn)品名稱:牛源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法
規(guī)格: 48T 0.2PCR管
貨號:BK-P97203
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
甲鈷胺質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMecobalamin 大鼠網(wǎng)膜素(omein)ELISA檢測試劑盒RatomeinELISAKit 96T/48T 石蠟切片1脂皮爾斯(Pearse)間接染色試劑盒10
右旋酮洛芬氨丁三醇質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR(S)-Ketoprofen trometamol 人COP9 結(jié)構(gòu)光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2(擬南芥)(COPS2)試劑盒 Human COPS2 ELISA Kit ELISAKitLHRH人黃體生成素釋放激素規(guī)格:48T/96T
右旋酮洛芬氨丁三醇(標(biāo)
結(jié)晶紫Crystal violet質(zhì)量規(guī)格:BS 小鼠血管生成素樣蛋白1(ANGPTL1)ELISA試劑盒 ,英文名: ANGPTL1 ELISA Kit ELISAKitTPO小鼠血小板生成素規(guī)格:48T/96T
結(jié)晶紫(進(jìn)口)Crystal violet質(zhì)量規(guī)格:用于生化研究,進(jìn)口 兔子前列腺素E2(PGE2)ELISA檢測試劑盒rabbitProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit 96T/48T Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAFELISAKit人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硝基四唑紫(INT)Iodonitrotetrazolium chloride(INT)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 犬P選擇素(SELP)試劑盒 Dog P-selectin,SELP ELISA kit 人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
乙基紫Ethyl Violet質(zhì)量規(guī)格:80%,進(jìn)分 英文名稱HumanNSEELISAKit人神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)試劑盒 Mouse Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B ELISA kit
人胰腺癌細(xì)胞;AsPC-15’-DMT-2’-TBDMS-iBu-rG質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR5’-DMT-2’-TBDMS-iBu-rG
CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5’-DMT-2’-TBDMS-Ac-rC質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR5’-DMT-2’-TBDMS-Ac-rC
兔骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Rabbit bone marrow mesenchymal stem cells5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rA質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rA
SF-295細(xì)胞,人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞 毛霉 人腸平滑肌細(xì)胞RNAHISMC miRNA5 μgDMT保護(hù)性脫氧肌苷質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDMT-dI
SF126(人腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×25,6-二甲基-1,10-菲咯啉(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)5,6-Dimethyl-1,10-phenanthroline
牛源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞cDNAHSkMSC cDNA苯甲酰烏頭原堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Benzoylhypacoitine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
IL12A Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 苯甲酰烏頭原堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Benzoylaconine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C8蝙蝠葛堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Dauricine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠誘導(dǎo)性多潛
注意事項:產(chǎn)品僅用于科研1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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